脂肪酶是目前應用最為廣泛的工業(yè)用酶之一，主要用于食品工業(yè)，如制備油脂、酒類的去混除渣，改善面包質量等。脂肪酶廣泛存在于動植物和微生物中，研究人員從某城市下水道淤泥中篩選出具脂肪酶高產活性的菌株，并探究其適宜的發(fā)酵條件?；卮鹣铝袉栴}：
（1）如圖1為脂肪酶生產菌富集培養(yǎng)基的配方：

按物理性質劃分，富集培養(yǎng)基為

液體

液體

培養(yǎng)基，橄欖油的作用是為脂肪酶生產菌提供

碳源

碳源

，富集培養(yǎng)時需要進行搖床振蕩培養(yǎng)，其目的是

可增加培養(yǎng)液的溶氧量，并促進菌體與營養(yǎng)物質充分接觸

可增加培養(yǎng)液的溶氧量，并促進菌體與營養(yǎng)物質充分接觸

。
（2）在純化分離的操作中，用接種環(huán)沾取一定量經過富集的菌液，用平板劃線法接種時，第二次及以后的劃線，都要從上一次劃線的末端引線，原因是

使細菌的數目隨著劃線次數的增加而逐步減少，最終得到由單個細菌繁殖而來的菌落

使細菌的數目隨著劃線次數的增加而逐步減少，最終得到由單個細菌繁殖而來的菌落

，接種后，需要將平板倒置培養(yǎng)，以防止

皿蓋上的冷凝水滴入培養(yǎng)基，造成污染

皿蓋上的冷凝水滴入培養(yǎng)基，造成污染

。
（3）初篩用橄欖油雙層瓊脂平板，平板底層含瓊脂和橄欖油，表層為肉汁胨瓊脂培養(yǎng)基。將用無菌水從（2）中平板沖下的菌液稀釋后，涂布到初篩培養(yǎng)基，挑選透明圈直徑與菌落的直徑之比

大

大

（填“大”或“小”）的菌落接種到肉汁胨斜面培養(yǎng)基上保藏。通過復篩，篩選出酶活性最高的菌種。
（4）研究人員繼續(xù)探究了pH對該脂肪酶活性的影響（所選為堿性脂肪酶），得到如圖2所示的實驗結果，堿性脂肪酶的活性測定可以采用平板測定法，其原理是利用堿性脂肪酶可以分解脂肪形成游離脂肪酸，脂肪酸可以使指示劑維多利亞藍變色，而產生變色圈，根據該原理，在本研究中，酶活性的測量指標是

變色圈直徑

變色圈直徑

，根據曲線，pH為

8.5

8.5

時，堿性脂肪酶活性最高。