CAR-T療法僅僅靠打針就能殺死癌細(xì)胞，一時(shí)間讓國內(nèi)醫(yī)藥圈為之沸騰。CAR-T療法的全稱是嵌合抗原受體T細(xì)胞療法，CAR-T療法的操作步驟是：①直接采取患者的外周血，分離出其中的T淋巴細(xì)胞；②將分離的T淋巴細(xì)胞在體外進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)改造，裝載上具有識(shí)別腫瘤抗原的受體及其刺激分子，形成CAR-T細(xì)胞；③將CAR-T細(xì)胞在體外進(jìn)行培養(yǎng)，大量擴(kuò)增讓其數(shù)量成倍增加；④體外擴(kuò)增后再回輸?shù)交颊唧w內(nèi)，從而識(shí)別并攻擊自身的腫瘤細(xì)胞。改造細(xì)胞回輸體內(nèi)后，這些細(xì)胞一旦遇見表達(dá)對(duì)應(yīng)抗原的腫瘤細(xì)胞，便會(huì)被激活并再擴(kuò)增，發(fā)揮其極大的特異殺傷力，殺死癌細(xì)胞。回答下列問題：
（1）從患者體內(nèi)分離的T淋巴細(xì)胞，需要對(duì)其進(jìn)行基因工程改造，以得到CAR-T細(xì)胞。
①基因工程最核心的步驟是
基因表達(dá)載體的構(gòu)建
基因表達(dá)載體的構(gòu)建
。
②構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，一般將目的基因插在啟動(dòng)子和終止子之間。啟動(dòng)子的作用是 RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA
RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA
。
③可以通過PCR技術(shù)獲得大量目的基因，利用該技術(shù)時(shí)擴(kuò)增目的基因時(shí)每次循環(huán)可分為 變性、復(fù)性、延伸
變性、復(fù)性、延伸
三步，其中第三步所使用的酶是 耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）
耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）
。
（2）體外培養(yǎng)患者CAR-T細(xì)胞時(shí)，不僅要確保 無菌、無毒
無菌、無毒
的環(huán)境條件，還要定期更換培養(yǎng)液，這樣做的目的是 清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害
清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害
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（3）結(jié)合題干信息分析，CAR-T療法價(jià)格高昂的原因可能是 是因?yàn)樗枰o每個(gè)癌癥患者進(jìn)行“量身定制”，不能批量化生產(chǎn)降低成本；需要借助基因工程和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，技術(shù)要求高且容易失敗
是因?yàn)樗枰o每個(gè)癌癥患者進(jìn)行“量身定制”，不能批量化生產(chǎn)降低成本；需要借助基因工程和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，技術(shù)要求高且容易失敗
（答出2點(diǎn)即可）。
