強(qiáng)光下番茄葉片細(xì)胞內(nèi)會(huì)通過促進(jìn)NPQ(一種光保護(hù)機(jī)制)的激活,避免高光造成的損傷。研究發(fā)現(xiàn)下部葉片雖未受強(qiáng)光照,但其NPQ活躍程度會(huì)隨之發(fā)生變化,從而使整株植物均可抵抗高光。推測是上部產(chǎn)生物質(zhì)H并傳遞到下部,促進(jìn)NPQ激活,且該變化受物質(zhì)H的量的影響。現(xiàn)利用野生型番茄獲得H沉默植株(A)和H過表達(dá)植株(B),并通過嫁接實(shí)驗(yàn)以驗(yàn)證上述猜測。
注:TRV載體引起細(xì)胞內(nèi)的與其攜帶基因相同序列(靶基因)的mRNA降解
(1)結(jié)合信息,本實(shí)驗(yàn)中目的基因應(yīng)選用
(物質(zhì))H基因
(物質(zhì))H基因
。該目的基因可通過 PCR (人工合成)
PCR (人工合成)
技術(shù)獲得。結(jié)合普通農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒的作用,請(qǐng)說出番茄A構(gòu)建過程中“特殊”農(nóng)桿菌的作用特點(diǎn) 無需將目的基因整合到Ti質(zhì)粒 (T-DNA) 上,而直接可將外源重組病毒載體轉(zhuǎn)入植物攝胞
無需將目的基因整合到Ti質(zhì)粒 (T-DNA) 上,而直接可將外源重組病毒載體轉(zhuǎn)入植物攝胞
。
(2)分子水平上,可通過 抗原-抗體雜交
抗原-抗體雜交
(方法)檢測物質(zhì)H是否生成,以確定植株A是否成功構(gòu)建;若鑒定植株B的構(gòu)建情況,則需檢測 物質(zhì)H的量
物質(zhì)H的量
,以確定是否成功構(gòu)建。
(3)嫁接實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)如下:
組別 |
1組 |
2組 |
3組 |
上部葉片 |
植株A |
野生型 |
Ⅰ 植株B 植株B |
下部葉片 |
野生型 |
野生型 |
Ⅱ 野生型 野生型 |
檢測下部葉片NPQ強(qiáng)度 |
①在上表橫線處完善實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),Ⅰ、Ⅱ的番茄植株應(yīng)分別選用
植株B
植株B
、
野生型
野生型
。(填“野生型”、“植株A”或“植株B”);
②若結(jié)果為
下部葉片NPQ的強(qiáng)度1組<2組<3組
下部葉片NPQ的強(qiáng)度1組<2組<3組
,則證明上述推測成立。