圖一是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人胰島素的操作過程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖作答。

（1）過程①表示在

逆轉(zhuǎn)錄

逆轉(zhuǎn)錄

酶作用下形成

胰島素基因

胰島素基因

。人胰島素mRNA只能取自

胰島B

胰島B

細(xì)胞，其他組織細(xì)胞中沒有的原因

胰島素基因只在胰島B細(xì)胞內(nèi)表達(dá)

胰島素基因只在胰島B細(xì)胞內(nèi)表達(dá)

。
（2）胰島素mRNA部分序列為5'-ADC1ALGCGCUCALCAG…（中間省略3n個(gè)核苷酸序列）…CGCAGCAAUGAGUAGCG-3'。為擴(kuò)增目的基因，某同學(xué)設(shè)計(jì)了如下六種PCR引物，其中可選用的引物是

①⑥

①⑥

。
①5'-ATCTATGCGCTCATCAG-3'
②5'-GACTACTCGCGTATCTA-3'
③5'-CGCAGCAATGAGTAGCG-3'
④5'-GCGATGAGTAACGACGC-3'
⑤5'-TAGATACGCGAGTAGTC-3'
⑥5'-CGCTACTCATTGCTGCG-3'
（3）如圖二是運(yùn)載體和胰島素基因的某個(gè)片段，已知限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-G^↓GATCC-，限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-^↓GATC-。Genel和GeneⅡ?yàn)闃?biāo)記基因，根據(jù)圖示，判斷下列操作正確的是

A

A

。

A.質(zhì)粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割
B.質(zhì)粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割
C.目的基因和質(zhì)粒均用限制酶Ⅰ切割
D.目的基因和質(zhì)粒均用限制酶Ⅱ切割
（4）為使過程⑧更易進(jìn)行，可用

Ca²⁺

Ca²⁺

處理D。通過圖一方法生產(chǎn)的胰島素可能不具備生物活性，理由

大腸桿菌沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不能對(duì)核糖體合成的蛋白質(zhì)進(jìn)一步加工

大腸桿菌沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不能對(duì)核糖體合成的蛋白質(zhì)進(jìn)一步加工

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（5）利用轉(zhuǎn)基因牛、羊乳汁提取藥物工藝簡(jiǎn)單，甚至可能直接飲用治病?？梢詫⑺幬锏鞍谆蚝?

乳腺蛋白基因

乳腺蛋白基因

的啟動(dòng)子重組，構(gòu)建基因表達(dá)載體，導(dǎo)入

性染色體組成為XX的受精卵

性染色體組成為XX的受精卵

中獲得轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。也可以將藥用蛋白基因?qū)雱?dòng)物如牛、羊的膀胱上皮細(xì)胞中，利用轉(zhuǎn)基因牛羊尿液生產(chǎn)提取藥物，比乳汁提取藥物的更大優(yōu)越性在于

不受性別和發(fā)育時(shí)期的限制

不受性別和發(fā)育時(shí)期的限制

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