棉鈴蟲載脂蛋白受體（LpR）在昆蟲體內(nèi)脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)中發(fā)揮重要作用。為了明確載脂蛋白受體（LpR）基因在其卵巢發(fā)育及饑餓脅迫中的功能，科研人員研究了棉鈴蟲不同發(fā)育階段以及饑餓處理對(duì)該基因表達(dá)的影響。這有助于解析載脂蛋白受體（LpR）基因參與棉鈴蟲卵巢發(fā)育過(guò)程中脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)以及應(yīng)對(duì)饑餓脅迫的作用。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）獲取棉鈴蟲載脂蛋白受體（LpR）基因：將棉鈴蟲樣品置于預(yù)冷的研缽內(nèi)，加入液氮研磨成粉末后迅速提取

總RNA（RNA）

總RNA（RNA）

，經(jīng)

逆轉(zhuǎn)錄（反轉(zhuǎn)錄）

逆轉(zhuǎn)錄（反轉(zhuǎn)錄）

得到cDNA。
（2）體外擴(kuò)增棉鈴蟲載脂蛋白受體（LpR）基因：
①PCR加樣操作：將上述cDNA作為PCR反應(yīng)的模板，并設(shè)計(jì)一對(duì)特異性引物來(lái)擴(kuò)增目的基因，該P(yáng)CR反應(yīng)體系中除模板和引物外，還需加入緩沖液（含Mg²⁺）、

TaqDNA聚合酶

TaqDNA聚合酶

、

4種脫氧核苷酸

4種脫氧核苷酸

H₂O等。
②設(shè)置PCR反應(yīng)程序：PCR每次循環(huán)一般可以分為

變性

變性

、

復(fù)性

復(fù)性

和延伸三步，在延伸過(guò)程中，脫氧核苷酸連接在引物的

3'

3'

端。
（3）PCR結(jié)果分析：

①圖1為棉鈴蟲載脂蛋白受體（LpR）基因在棉鈴蟲不同發(fā)育階段的表達(dá)情況。據(jù)圖可發(fā)現(xiàn)，棉鈴蟲載脂蛋白受體（LpR）基因在

雌成蟲（F）

雌成蟲（F）

中高表達(dá)，推測(cè)棉鈴蟲載脂蛋白受體（LpR）可能與雌蟲的生殖行為相關(guān)；同樣的，該基因在卵內(nèi)也高表達(dá)，這可能與

脂質(zhì)

脂質(zhì)

作為胚胎發(fā)育期的重要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)相關(guān)。
②圖2為饑餓脅迫對(duì)棉鈴蟲雌成蟲卵巢中載脂蛋白受體（LpR）基因表達(dá)的影響，據(jù)圖推測(cè)饑餓脅迫處理導(dǎo)致昆蟲產(chǎn)卵量降低可能跟

載脂蛋白受體（LpR）基因表達(dá)受到抑制，從而減少了卵巢對(duì)脂質(zhì)的攝入

載脂蛋白受體（LpR）基因表達(dá)受到抑制，從而減少了卵巢對(duì)脂質(zhì)的攝入

有關(guān)。