31．腦梗死又稱缺血性腦卒中，是腦部血液循環(huán)障礙導(dǎo)致的局部腦組織壞死。為闡明腦組織神經(jīng)元損傷死亡的機(jī)制，進(jìn)行了如下研究。
（1）神經(jīng)元是神經(jīng)系統(tǒng)
和功能的基本單位，它由細(xì)胞體、樹突和
構(gòu)成。
（2）為制備大腦中動脈栓塞小鼠模型，研究人員對小鼠進(jìn)行手術(shù)：頸部切1cm長切口，插入線栓，阻塞大腦中動脈血流，1h后拔出線栓恢復(fù)血流，縫合皮膚。在恢復(fù)血流24h后，取腦組織切片進(jìn)行染色，結(jié)果如圖1，并檢測大腦組織內(nèi)Sirt3蛋白表達(dá)量，結(jié)果如圖2。
對照組小鼠的處理應(yīng)為
。圖 1腦切片中深色部分是正常組織，淺色部分是缺血造成的梗死部分。由染色結(jié)果可知，小鼠大腦中動脈栓塞模型制備
（ 選填“成功”或“不成功”）。圖2結(jié)果顯示，對照組大腦兩側(cè)Sirt3蛋白表達(dá)量無顯著差異，實驗組
。
（3）研究人員以小鼠海馬神經(jīng)元為材料，在體外模擬（2）實驗。實驗組的主要步驟依次是：將海馬神經(jīng)元置于常態(tài)條件培養(yǎng)8d→轉(zhuǎn)入“氧糖剝奪”條件（無糖培養(yǎng)基、低氧氣體環(huán)境）培養(yǎng)1h→轉(zhuǎn)入常態(tài)條件培養(yǎng)12h→檢測神經(jīng)元的損傷情況、神經(jīng)元內(nèi)Sirt3蛋白表達(dá)量。實驗中“氧糖剝奪”的目的是模擬體內(nèi)
條件。實驗結(jié)果顯示，體外實驗中神經(jīng)元的變化與體內(nèi)實驗基本一致。
（4）已有研究表明，線粒體功能障礙會導(dǎo)致神經(jīng)元損傷。推測Sirt3蛋白能夠避免血液循環(huán)障礙造成的線粒體功能障礙。為證明這一推測，研究人員設(shè)計了如表所示的實驗。
| 組別 |
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實驗處理 |
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檢測指標(biāo) |
| 步驟1 （24h） |
步驟2 （8d） |
步驟3 （1h） |
步驟4 （12h） |
| 甲組 |
用不含Sirt3基因表達(dá)質(zhì)粒的慢病毒感染細(xì)胞 |
常態(tài)條
件培養(yǎng) |
常態(tài)條
件培養(yǎng) |
常態(tài)條
件培養(yǎng) |
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| 乙組 |
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| 丙組 |
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注：慢病毒是一種常用載體
從下列選項中選出合適的實驗處理，填入表格完善實驗設(shè)計。
a.用不含Sir3基因表達(dá)質(zhì)粒的慢病毒感染細(xì)胞
b.用含有Sir3基因表達(dá)質(zhì)粒的慢病毒感染細(xì)胞
c.常態(tài)條件培養(yǎng)
d.“氧糖剝奪”條件培養(yǎng)
e.檢測Sir3蛋白表達(dá)量。
f.檢測線粒體功能
