白葉枯病是造成我國重要糧食作物——水稻嚴重減產(chǎn)的重要原因之一。某科研團隊將白葉枯病抗性基因Xa21與質粒重組(圖1),利用人工破損處理的水稻幼苗細胞借助根癌農(nóng)桿菌轉化法獲得抗白葉枯病的水稻品種,其中根癌農(nóng)桿菌侵染植物細胞過程如圖2所示,已知不同種限制酶識別序列不同。請回答下列問題:
(1)構建圖1基因表達載體時,最佳方案是使用 BamHⅠ、HindⅢBamHⅠ、HindⅢ分別處理含Xa21基因的DNA片段和Ti質粒,該方案不僅可以避免處理后的白葉枯病抗性基因Xa21和Ti質粒發(fā)生 自身環(huán)化和反向鏈接自身環(huán)化和反向鏈接,也能確保Xa21基因定點插入Ti質粒的 T-DNA片段T-DNA片段。
(2)基因表達載體上M抗生素抗性基因的作用是 有利于重組Ti質粒的篩選有利于重組Ti質粒的篩選。
(3)由圖2可知,水稻幼苗細胞受損后會產(chǎn)生某些信號分子,用于吸引農(nóng)桿菌移向受損水稻,這些信號分子可能是酚類化合物,農(nóng)桿菌細胞內形成的成熟T復合體借助細胞膜上的通道復合體定向進入水稻幼苗細胞,最終目標是 將含有Xa2l基因的T-DNA整合到水稻細胞染色體DNA上將含有Xa2l基因的T-DNA整合到水稻細胞染色體DNA上。
(4)將含白葉枯病抗性基因Xa21的水稻幼苗細胞經(jīng)過 植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)技術可發(fā)育成幼苗。經(jīng)檢測,科研人員發(fā)現(xiàn)部分獲得Xa21基因的水稻幼苗不具有抗白葉枯病的能力,原因可能是 Xa2l基因轉錄和翻譯異常Xa2l基因轉錄和翻譯異常。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】BamHⅠ、HindⅢ;自身環(huán)化和反向鏈接;T-DNA片段;有利于重組Ti質粒的篩選;將含有Xa2l基因的T-DNA整合到水稻細胞染色體DNA上;植物組織培養(yǎng);Xa2l基因轉錄和翻譯異常
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:81引用:1難度:0.6
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