當(dāng)前位置： 2020年黑龍江省哈爾濱六中高考生物三模試卷> 試題詳情

基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心。圖中甲為限制酶EcoRⅠ的識(shí)別序列，圖乙表示目的基因及限制酶切點(diǎn)，圖丙表示目的基因上的DNA片段，圖丁表示質(zhì)粒。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）從供體真核生物的某組織中獲取mRNA，并以此為模板反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生多種片段，與載體連接后儲(chǔ)存在一個(gè)受體菌群中，該受體菌群體叫
cDNA
cDNA
文庫(kù)，從該文庫(kù)中獲得的目的基因
不含
不含
（填“含”或“不含”）啟動(dòng)子、終止子、內(nèi)含子。
（2）若用圖甲所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA，就其專一性而言，切開的是G和A所在的兩個(gè)
脫氧核苷酸
脫氧核苷酸
之間的
磷酸二酯
磷酸二酯
鍵，即圖丙的②處。
（3）為了使目的基因和質(zhì)粒定向連接，并且有利于受體細(xì)胞的篩選，提高重組效率，應(yīng)該選擇的限制酶是PstⅠ和
EcoRⅠ
EcoRⅠ
，如果大腸桿菌是受體細(xì)胞，則其體內(nèi)應(yīng)不含
抗四環(huán)素
抗四環(huán)素
基因，以利于篩選出含質(zhì)粒的受體菌。
（4）PCR技術(shù)擴(kuò)增圖乙中的目的基因時(shí)，需要提供模板、Taq酶、
dNTP
dNTP
（原料）、引物C和引物
B
B
等條件。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．

【答案】cDNA；不含；脫氧核苷酸；磷酸二酯；EcoRⅠ；抗四環(huán)素；dNTP；B

【解答】

【點(diǎn)評(píng)】

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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：24引用：2難度：0.6

相似題

1．番茄含有豐富的維生素，但不耐寒。科學(xué)家將魚的抗凍蛋白基因?qū)敕鸭?xì)胞，并進(jìn)行組織培養(yǎng)得到轉(zhuǎn)基因番茄植株，并將該植株種植在寒冷環(huán)境中，發(fā)現(xiàn)番茄植株并無(wú)抗寒性狀。為了找出不抗寒的原因，科學(xué)家提取轉(zhuǎn)基因番茄細(xì)胞中的有關(guān)成分進(jìn)行了如下分析?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）提取細(xì)胞中的

，采用抗原―抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，若能檢測(cè)到抗凍蛋白，但含量非常少，其原因可能是

。魚的抗凍蛋白基因能在番茄細(xì)胞內(nèi)成功表達(dá)的理論基礎(chǔ)是

。
（2）若經(jīng)上一步檢測(cè)確定細(xì)胞中無(wú)抗凍蛋白，可采用分子雜交技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞中的RNA和DNA。該技術(shù)依據(jù)的原理是

，檢測(cè)過(guò)程中需使用DNA探針進(jìn)行檢測(cè)，若出現(xiàn)DNA―RNA的雜交帶，說(shuō)明

，則可能是

導(dǎo)致無(wú)抗凍蛋白。
（3）若經(jīng)檢測(cè)確定細(xì)胞中無(wú)抗凍蛋白的mRNA，使用DNA探針對(duì)細(xì)胞內(nèi)的基因組DNA進(jìn)行檢測(cè)，若出現(xiàn)DNA―DNA的雜交帶，說(shuō)明

，則可能是抗凍蛋白基因反向插入質(zhì)粒中導(dǎo)致抗凍蛋白基因無(wú)法正常表達(dá)。若經(jīng)檢測(cè)確定細(xì)胞中無(wú)抗凍蛋白基因，說(shuō)明在轉(zhuǎn)化過(guò)程中，可能導(dǎo)入番茄細(xì)胞的是

（填“普通質(zhì)粒”或“重組質(zhì)?！保?。
發(fā)布：2024/11/8 11:0:1組卷：5引用：1難度：0.5
解析

2．運(yùn)用現(xiàn)代生物技術(shù)的育種方法，將抗菜青蟲的Bt基因轉(zhuǎn)移到優(yōu)質(zhì)油菜中，培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲的油菜品種，這一品種在生長(zhǎng)過(guò)程中能產(chǎn)生特異的殺蟲蛋白質(zhì)，對(duì)菜青蟲有顯著抗性，能大大減輕菜青蟲對(duì)油菜的危害，提高油菜產(chǎn)量，減少農(nóng)藥使用，據(jù)以上信息，下列敘述正確的是（　　）

A．Bt基因的化學(xué)成分是蛋白質(zhì)

B．Bt基因中有菜青蟲的遺傳物質(zhì)

C．轉(zhuǎn)基因抗蟲油菜能產(chǎn)生殺蟲蛋白是由于具有Bt基因

D．轉(zhuǎn)基因抗蟲油菜產(chǎn)生的殺蟲蛋白是無(wú)機(jī)物

發(fā)布：2024/11/7 11:0:1組卷：104引用：32難度：0.7

解析

3．CAR-T療法僅僅靠打針就能殺死癌細(xì)胞，一時(shí)間讓國(guó)內(nèi)醫(yī)藥圈為之沸騰。CAR-T療法的全稱是嵌合抗原受體T細(xì)胞療法，CAR-T療法的操作步驟是：①直接采取患者的外周血，分離出其中的T淋巴細(xì)胞；②將分離的T淋巴細(xì)胞在體外進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)改造，裝載上具有識(shí)別腫瘤抗原的受體及其刺激分子，形成CAR-T細(xì)胞；③將CAR-T細(xì)胞在體外進(jìn)行培養(yǎng)，大量擴(kuò)增讓其數(shù)量成倍增加；④體外擴(kuò)增后再回輸?shù)交颊唧w內(nèi)，從而識(shí)別并攻擊自身的腫瘤細(xì)胞。改造細(xì)胞回輸體內(nèi)后，這些細(xì)胞一旦遇見表達(dá)對(duì)應(yīng)抗原的腫瘤細(xì)胞，便會(huì)被激活并再擴(kuò)增，發(fā)揮其極大的特異殺傷力，殺死癌細(xì)胞?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）從患者體內(nèi)分離的T淋巴細(xì)胞，需要對(duì)其進(jìn)行基因工程改造，以得到CAR-T細(xì)胞。
①基因工程最核心的步驟是

。
②構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，一般將目的基因插在啟動(dòng)子和終止子之間。啟動(dòng)子的作用是

。
③可以通過(guò)PCR技術(shù)獲得大量目的基因，利用該技術(shù)時(shí)擴(kuò)增目的基因時(shí)每次循環(huán)可分為

三步，其中第三步所使用的酶是

。
（2）體外培養(yǎng)患者CAR-T細(xì)胞時(shí)，不僅要確保

的環(huán)境條件，還要定期更換培養(yǎng)液，這樣做的目的是

。
（3）結(jié)合題干信息分析，CAR-T療法價(jià)格高昂的原因可能是

（答出2點(diǎn)即可）。
發(fā)布：2024/11/8 11:59:57組卷：3引用：2難度：0.5
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