黃曲霉素是黃曲霉菌等霉菌產(chǎn)生的對(duì)人和動(dòng)物具有劇毒、強(qiáng)致癌的一類(lèi)代謝產(chǎn)物,包括AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1等幾種。其中AFB1是對(duì)玉米和花生造成污染最嚴(yán)重的黃曲霉素。通過(guò)制備單克隆抗體可明顯提高對(duì)玉米等糧食中黃曲霉素檢測(cè)的靈敏度和特異性。
(1)AFB1進(jìn)入細(xì)胞后能與tRNA結(jié)合形成復(fù)合物,抑制tRNA與某些氨基酸結(jié)合,從而干擾基因表達(dá)的 翻譯翻譯過(guò)程。AFB1能特異性誘發(fā)人肝細(xì)胞中抑癌基因p53發(fā)生堿基對(duì)替換,從而使該基因發(fā)生 突變突變,誘發(fā)肝癌。
(2)以下是抗AFB1的單克隆抗體的簡(jiǎn)要制備思路。
①AFB1屬于小分子物質(zhì),不具有刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體的免疫原性,制備時(shí)需要將AFB1與某些物質(zhì)結(jié)合成具有免疫原性的完全抗原。下列物質(zhì)中不能參與合成完全抗原的是 c、d、ec、d、e。
a.牛血清白蛋白b.卵清蛋白 c.丙氨酸d.葡萄糖 e.香豆素
②將經(jīng)完全抗原AFB1-BSA(BSA是牛血清白蛋白)免疫的小鼠的脾臟細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞通過(guò)融合,經(jīng)選擇培養(yǎng)基篩選和檢測(cè)等過(guò)程,最終選擇出 抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交瘤(能產(chǎn)生抗AFB1抗體的雜交瘤)抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交瘤(能產(chǎn)生抗AFB1抗體的雜交瘤)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),從培養(yǎng)液中分離提純得到抗AFB1的抗體。
③利用抗原—抗體雜交技術(shù)對(duì)抗AFB1抗體進(jìn)行特異性和靈敏度鑒定。下表是三種抗AFBI抗體的交叉反應(yīng)鑒定結(jié)果。
被測(cè)黃曲霉素 | AFB1 | AFB2 | AFG1 | AFG2 | AFM1 |
2A11交叉反應(yīng)率(%) | 100 | 17.1 | 0.56 | 0.37 | 未檢測(cè)到 |
3A12交叉反應(yīng)率(%) | 100 | 7.8 | 20.2 | 0.6 | <0.1 |
3G1交叉反應(yīng)率(%) | 100 | 6.4 | <0.1 | <0.1 | 未檢測(cè)到 |
I.上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果中,3種抗AFB1抗體與除AFB1外的其他黃曲霉素均能發(fā)生一定的反應(yīng),原因是
AFB1與其他黃曲霉素在結(jié)構(gòu)上有相似性
AFB1與其他黃曲霉素在結(jié)構(gòu)上有相似性
。Ⅱ.根據(jù)交叉反應(yīng)結(jié)果,應(yīng)選用能產(chǎn)生
3G1
3G1
抗體的雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)以獲得大量的該抗體用于檢測(cè)。(3)香豆素(C9H6O2)是一種對(duì)人畜低毒的AFB1結(jié)構(gòu)類(lèi)似物。玉米種植土壤中存在利用胞外酶降解AFB1的多種微生物?,F(xiàn)要對(duì)已污染的玉來(lái)樣品進(jìn)行AFB1的微生物脫毒處理,請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)安全,有效的生物處理方案。
【答案】翻譯;突變;c、d、e;抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交瘤(能產(chǎn)生抗AFB1抗體的雜交瘤);AFB1與其他黃曲霉素在結(jié)構(gòu)上有相似性;3G1
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:28引用:1難度:0.7
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1.CD47是一種跨膜糖蛋白,它可與巨噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合,從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6~5倍,導(dǎo)致吞噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱。科學(xué)家推測(cè),抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用,為此他們按照如圖流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。下列敘述正確的是( )
發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:7引用:3難度:0.6 -
2.雙特異性抗體是指一個(gè)抗體分子可以與兩個(gè)不同抗原或同一抗原的兩個(gè)不同抗原表位相結(jié)合,目前最常利用雜交瘤雜交法來(lái)制備。長(zhǎng)春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉,其所含的長(zhǎng)春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是某雙特異性抗體作用圖。圖2是科研人員通過(guò)雜交—雜交瘤細(xì)胞技術(shù)(免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù))生產(chǎn)能同時(shí)識(shí)別癌胚抗原和長(zhǎng)春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過(guò)程。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題:
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(4)與直接使用長(zhǎng)春堿相比,將長(zhǎng)春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥,對(duì)人體的副作用更小,原因是發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:21引用:4難度:0.5 -
3.使用高效的細(xì)胞毒素藥物進(jìn)行化療可以有效殺傷腫瘤細(xì)胞但細(xì)胞毒素沒(méi)有特異性,在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)還會(huì)對(duì)健康細(xì)胞造成傷害。這限制了它在臨床上的應(yīng)用??贵w一藥物偶聯(lián)物(ADC)通過(guò)將細(xì)胞毒素與能特異性識(shí)別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合,實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細(xì)胞毒素)三部分組成,它的作用機(jī)制如圖所示。下列敘述正確的是( )
發(fā)布:2024/12/31 3:30:1組卷:18引用:2難度:0.7
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