如圖為三種質(zhì)粒和一個(gè)含目的基因的片段的示意圖．復(fù)制原點(diǎn)是質(zhì)粒能正常復(fù)制的必需組成．圖中Ap為氨芐青霉素抗性基因，Tc為四環(huán)素抗性基因，lacZ為藍(lán)色顯色基因，EcoRⅠ（0.7Kb）、PvuⅠ（0.8Kb）等為限制酶及其切割的位點(diǎn)與復(fù)制原點(diǎn)的距離，1Kb=1000個(gè)堿基對(duì)長(zhǎng)度．請(qǐng)據(jù)圖回答：
（1）質(zhì)粒A、C不能作為目的基因運(yùn)載體的理由分別是缺少標(biāo)記基因、復(fù)制原點(diǎn)被限制酶切割缺少標(biāo)記基因、復(fù)制原點(diǎn)被限制酶切割．
（2）將圖中的目的基因與質(zhì)粒B進(jìn)行重組，需要用到限制酶（PvuⅠ）和DNA連接酶限制酶（PvuⅠ）和DNA連接酶酶．
如果是兩兩重組，可能有33種長(zhǎng)度的重組結(jié)果．
（3）基因工程中檢測(cè)篩選含有目的基因的重組質(zhì)粒是一個(gè)重要的步驟．現(xiàn)運(yùn)用EcoRⅠ酶切質(zhì)粒，完全酶切后進(jìn)行電泳觀察，若出現(xiàn)長(zhǎng)度為1.1kb1.1kb和5.6 kb5.6 kb，或者3.1 kb3.1 kb和3.6 kb3.6 kb的片段，則可以判斷該質(zhì)粒已與目的基因重組成功．
（4）若選擇自身不含lacZ基因并對(duì)抗生素敏感的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，則在篩選導(dǎo)入成功的受體細(xì)胞時(shí)應(yīng)如何操作？在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)經(jīng)過導(dǎo)入處理的大腸桿菌，若能形成白色菌落的即為導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)經(jīng)過導(dǎo)入處理的大腸桿菌，若能形成白色菌落的即為導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌．
（5）下列關(guān)于質(zhì)粒運(yùn)載體的說法正確的是ADFADF（多選）．
A．使用質(zhì)粒運(yùn)載體是為了避免目的基因被分解
B．質(zhì)粒運(yùn)載體只能在與目的基因重組后進(jìn)入細(xì)胞
C．質(zhì)粒運(yùn)載體可能是從細(xì)菌或者病毒的DNA改造的
D．質(zhì)粒運(yùn)載體的復(fù)制和表達(dá)也遵循中心法則
E．質(zhì)粒運(yùn)載體只有把目的基因整合到受體細(xì)胞的DNA中才能表達(dá)
F．沒有限制酶就無法使用質(zhì)粒運(yùn)載體．
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】缺少標(biāo)記基因、復(fù)制原點(diǎn)被限制酶切割；限制酶（PvuⅠ）和DNA連接酶；3；1.1kb；5.6 kb；3.1 kb；3.6 kb；在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)經(jīng)過導(dǎo)入處理的大腸桿菌，若能形成白色菌落的即為導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌；ADF
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：19引用：3難度：0.5
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