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如圖所示為A,B、C三種質(zhì)粒和一個含目的基因D的DNA片段示意圖。圖中Ap為氨芐青霉素抗性基因,Tc為四環(huán)素抗性基因,lacZ為藍色顯色基因,EcoRⅠ,PvuⅠ為兩種限制酶,質(zhì)粒上限制酶括號內(nèi)的數(shù)字表示限制酶切割位點與復制原點的距離?;卮鹣铝袉栴}:
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(1)據(jù)圖分析質(zhì)粒A、C一般不能作為運載體的理由分別是
(質(zhì)粒A)缺少標記基因
(質(zhì)粒A)缺少標記基因
、
(質(zhì)粒A)缺少標記基因、(質(zhì)粒C)復制原點會被限制酶切割
(質(zhì)粒A)缺少標記基因、(質(zhì)粒C)復制原點會被限制酶切割
。若要獲取目的基因,應該選用
PvuⅠ
PvuⅠ
酶切割。
(2)將圖中的目的基因與質(zhì)粒B進行重組。在基因工程的操作過程中,需要檢查目的基因是否重組到質(zhì)粒中,應使用
EcoRⅠ
EcoRⅠ
酶切重組質(zhì)粒,完全酶切后,進行電泳檢測。若電泳圖譜中出現(xiàn)長度為1.1kb和5.6kb,或者
3.1
3.1
kb和
3.6
3.6
kb的片段,則可判斷該重組質(zhì)粒已與目的基因重組成功(重組質(zhì)粒上目的基因的插入位點與EcoRⅠ的識別位點之間的堿基對忽略不計)。
(3)若選擇自身不含lacZ基因并對抗生素敏感的大腸桿菌作為受體細胞,則如何篩選成功導入重組質(zhì)粒的受體細胞?
在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)經(jīng)過導入處理的大腸桿菌,能形成白色菌落的即為導入重組質(zhì)粒的大腸桿菌
在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)經(jīng)過導入處理的大腸桿菌,能形成白色菌落的即為導入重組質(zhì)粒的大腸桿菌
。目的基因能在大腸桿菌細胞內(nèi)表達出相同的蛋白質(zhì),其遺傳學基礎(chǔ)是
自然界的生物共用一套遺傳密碼子
自然界的生物共用一套遺傳密碼子
。

【答案】(質(zhì)粒A)缺少標記基因;(質(zhì)粒A)缺少標記基因、(質(zhì)粒C)復制原點會被限制酶切割;PvuⅠ;EcoRⅠ;3.1;3.6;在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)經(jīng)過導入處理的大腸桿菌,能形成白色菌落的即為導入重組質(zhì)粒的大腸桿菌;自然界的生物共用一套遺傳密碼子
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:17引用:2難度:0.6
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  • 1.基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應用發(fā)展迅速,如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/11/14 7:0:1組卷:62引用:7難度:0.7
  • 2.經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應,嚴重時甚至危及生命,因此必須對食品中生物胺的含量進行減控。微生物來源的多銅氧化酶(MCO)能高效分解生物胺,基于基因工程規(guī)?;a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因,然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實現(xiàn)了高效表達。
    (1)通過上述基因工程技術(shù)獲取目標產(chǎn)物,涉及如下步驟,則合理的操作步驟排序是
     
    (填寫下列編號)。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)?;a(chǎn)目標蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細胞
    ⑤目的基因和運載體重組構(gòu)建表達載體
    (2)在PCR過程中,引物的功能是
     
    。
    A.啟動DNA復制
    B.規(guī)定擴增區(qū)間
    C.解旋DNA雙鏈
    D.充當復制模板
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    (3)為獲得目的基因MCO(圖甲灰色表示的序列),正確設(shè)計的PCR引物應為圖甲中的
     

    (4)獲取目的基因后,需要和載體重組導入受體細胞。載體的化學本質(zhì)是
     
    (填DNA或RNA/DNA或RNA)。
    (5)在常規(guī)PCR的每一輪擴增反應中,溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    (6)若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端,那么載體質(zhì)粒pCLY15(圖丙中圖1)需用
     
     
    切開,才能與MCO片段高效連接。
    (7)下列實驗操作中,能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,用合適的限制酶切割
    B.在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑,以克隆的顏色進行鑒別
    C.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,以此為模板進行PCR檢測
    D.將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc(四環(huán)素)的平板上,根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布:2024/11/14 4:30:2組卷:29引用:3難度:0.5
  • 3.用限制酶EcoRⅤ單獨切割某普通質(zhì)粒,可產(chǎn)生14kb(1kb即1000個堿基對)的長鏈,而同時用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒,可得到三種長度的DNA片段,見圖(其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個黏性末端)。
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    若用MboⅠ限制酶單獨切割該普通質(zhì)粒,則產(chǎn)生的DNA片段的長度為( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/14 4:0:2組卷:89引用:9難度:0.7
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