當(dāng)前位置： 2022-2023學(xué)年遼寧省六校協(xié)作體高二（下）聯(lián)考生物試卷（3月份）> 試題詳情

牛和羊的瘤胃中生活著多種微生物，其中許多微生物能分解尿素。某研究小組欲從瘤胃內(nèi)篩選出能高效降解尿素的細(xì)菌，設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)。
Ⅰ.取樣：從剛宰殺的牛的瘤胃中取樣，將樣品裝入事先滅過菌的錐形瓶中。
Ⅱ.培養(yǎng)基的配制和滅菌：
配制全營養(yǎng)LB固體培養(yǎng)基。配方：水、蛋白胨，酵母提取物，NaCl,瓊脂糖。（備注：瓊脂糖是一種鏈狀多糖，35-40℃時(shí)形成半固體狀凝膠，90℃以上溶解；瓊脂主要成分為瓊脂糖和果膠，還有少量含氮化合物等）
配制尿素固體培養(yǎng)基。配方：水、葡萄糖，NaCl,K₂HPO₄，尿素，酚紅，瓊脂糖。（備注：酚紅是一種酸堿指示劑，在酸性時(shí)呈黃色，堿性時(shí)呈紅色。）
Ⅲ.制備瘤胃稀釋液如圖并接種。
Ⅳ.在無氧條件下進(jìn)行微生物的培養(yǎng)、觀察與計(jì)數(shù)。
回答下列問題：

（1）尿素固體培養(yǎng)基需用瓊脂糖做凝固劑而不用瓊脂的原因是
瓊脂含有少量含氮化合物，為其他不能以尿素為氮源的微生物提供氮源，干擾篩選尿素分解菌
瓊脂含有少量含氮化合物，為其他不能以尿素為氮源的微生物提供氮源，干擾篩選尿素分解菌
。
（2）尿素培養(yǎng)基中加酚紅的原因是以尿素為氮源的微生物培養(yǎng)一段時(shí)間后，由于細(xì)菌產(chǎn)生的
脲酶
脲酶
向周圍擴(kuò)散，將培養(yǎng)基中的尿素分解，產(chǎn)生的
NH₃
NH₃
使培養(yǎng)基中的酚紅由黃色變成紅色。
（3）該小組采用稀釋涂布平板法對瘤胃中分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行分離和計(jì)數(shù)。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板（2種平板）先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是
檢測培養(yǎng)基是否被污染
檢測培養(yǎng)基是否被污染
。經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)，每隔24h統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目。為進(jìn)一步確定取自瘤胃中液體的適當(dāng)稀釋倍數(shù)，將接種的培養(yǎng)皿放置在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h～48h,觀察并統(tǒng)計(jì)具有紅色環(huán)帶的菌落數(shù)，結(jié)果如表，其中
3、4
3、4
號試管的稀釋倍數(shù)比較合適（請從如圖中1～5號試管中選擇填寫）。

稀釋倍數(shù) 1×10³ 1×10⁴ 1×10⁵ 1×10⁶ 1×10⁷

菌落數(shù) ＞500 367 248 36 18

（4）接下來，該小組對周圍紅色區(qū)域
大
大
（填“大”或“小”）的菌落進(jìn)行平板劃線法純化和分離，以便獲得單菌落。操作時(shí)，接種環(huán)通過
灼燒
灼燒
方法滅菌。在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目的是
將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落
將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落
。

【考點(diǎn)】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）．

【答案】瓊脂含有少量含氮化合物，為其他不能以尿素為氮源的微生物提供氮源，干擾篩選尿素分解菌；脲酶；NH₃；檢測培養(yǎng)基是否被污染；3、4；大；灼燒；將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落

【解答】

【點(diǎn)評】

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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：16引用：1難度：0.6

相似題

1．為加強(qiáng)對廢棄口罩的處理，某科研小組準(zhǔn)備從土壤中篩選出能夠高效降解一次性口罩，其主要成分為聚丙烯（僅由C、H兩種元素組成）的細(xì)菌，進(jìn)行了如圖所示實(shí)驗(yàn)。回答下列問題：
（1）配制用于篩選目的菌的固體培養(yǎng)基時(shí)，需要以

為唯一碳源，對配制好的培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，可采用的方法是

。
（2）若圖中平板上的菌落數(shù)過于密集，應(yīng)進(jìn)一步

，以便于菌落計(jì)數(shù)和分離。制備平板培養(yǎng)基時(shí)除了需要水、營養(yǎng)物質(zhì)，還必須添加

，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別是47、53、62個(gè)，據(jù)此可得出1g樣品中得活菌數(shù)為

個(gè)。
（3）篩選得到兩株目的菌L1、L2，實(shí)驗(yàn)人員在培養(yǎng)基中加入能與聚丙烯結(jié)合而顯色的染色劑，然后再分別接種兩株目的菌進(jìn)行培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)L1菌株周圍的透明圈直徑顯著大于L2的，可以得出的結(jié)論是①

；②

。
發(fā)布：2024/11/6 20:30:1組卷：2引用：4難度：0.6
解析
2．水產(chǎn)養(yǎng)殖中常通過添加抗生素保證養(yǎng)殖成活率，但長期使用抗生素會使抗生素抗性菌的耐藥性增加，某科技小組欲從經(jīng)常施用青霉素的魚塘底部淤泥中篩選青霉素抗性菌（目標(biāo)細(xì)菌），配制了如下幾種培養(yǎng)基。請回答下列問題：
甲種培養(yǎng)基：蛋白胨（10g/L），牛肉膏（5g/L），氯化鈉（5g/L），水。
乙種培養(yǎng)基：蛋白胨（10g/L），牛肉膏（5g/L），氯化鈉（5g/L），青霉素（190μg/mL或1000μg/mL），水。
丙種培養(yǎng)基：蛋白胨（10g/L），牛肉膏（5g/L），氯化鈉（5g/L），青霉素（190μg/mL），瓊脂（15g/L），水。
（1）上述三種培養(yǎng)基中可為細(xì)菌生長提供氮源的物質(zhì)是

。這三種培養(yǎng)基中，具有選擇目標(biāo)細(xì)菌作用的是

培養(yǎng)基。為了觀察目標(biāo)細(xì)菌的菌落特征，需要選擇上述三種培養(yǎng)基中的

培養(yǎng)基。
（2）取題述魚塘底部淤泥10g加入有

mL無菌水的玻璃三角瓶中，振蕩搖勻，獲得10¹倍的稀釋懸液，取100μL上述懸液接種于含有較低質(zhì)量濃度青霉素（190μg/mL）的乙種培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時(shí)間，此步操作的主要目的是

。
（3）將上述經(jīng)乙種培養(yǎng)基培養(yǎng)后的菌液涂布到丙種培養(yǎng)基之前，需要進(jìn)行梯度稀釋，進(jìn)行梯度稀釋的理由是：

。將稀釋后的菌液涂布到丙種培養(yǎng)基上，進(jìn)行培養(yǎng)的過程中，為防止皿蓋上形成的冷凝水滴落影響細(xì)菌的生長，需將培養(yǎng)皿

培養(yǎng)。培養(yǎng)后挑取丙種培養(yǎng)基上的目標(biāo)細(xì)菌接種到含有較高質(zhì)量濃度青霉素（1000μg/mL）的乙種培養(yǎng)基中培養(yǎng)，這步操作的主要目的是

。
發(fā)布：2024/11/6 8:0:1組卷：2引用：0難度：0.7
解析

3．下列有關(guān)細(xì)菌培養(yǎng)的敘述，正確的是（　?。?/h2>

A．不同細(xì)菌的菌落特征一般相同

B．在培養(yǎng)基中加入青霉素可促進(jìn)細(xì)菌生長

C．用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)破傷風(fēng)桿菌的過程中通入氧氣能促進(jìn)破傷風(fēng)桿菌的生長

D．培養(yǎng)醋酸桿菌時(shí)，往培養(yǎng)液中通入氧氣可以促進(jìn)菌體快速增殖

發(fā)布：2024/11/6 8:0:1組卷：8引用：1難度：0.7

解析

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稀釋倍數(shù)	1×10³	1×10⁴	1×10⁵	1×10⁶	1×10⁷
菌落數(shù)	＞500	367	248	36	18

3．下列有關(guān)細(xì)菌培養(yǎng)的敘述，正確的是（ ?。?/h2>

3．下列有關(guān)細(xì)菌培養(yǎng)的敘述，正確的是（　?。?/h2>