在菲律賓首都馬尼拉郊外的一片稻田里，一種被稱(chēng)為“金色大米”的轉(zhuǎn)基因水稻已經(jīng)悄然收獲。這種轉(zhuǎn)基因大米可以幫助人們補(bǔ)充每天必需的維生素A，由于含有可以生成維生素A的β胡蘿卜素，它呈現(xiàn)金黃色澤，故稱(chēng)“金色大米”。“金色大米”的培育流程如圖所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（已知酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-G^↓GATCC-，酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-^↓GATC-）
（1）培育“金色大米”的基因工程操作四步曲中，其核心是

基因表達(dá)載體的構(gòu)建

基因表達(dá)載體的構(gòu)建

。通過(guò)該操作形成了圖中的c,它的構(gòu)成至少包括目的基因、標(biāo)記基因、復(fù)制原點(diǎn)和

c 目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因

c 目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因

等。
（2）在研究過(guò)程中獲取了目的基因后采用

PCR

PCR

技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，在構(gòu)建c的過(guò)程中目的基因用

限制酶Ⅱ

限制酶Ⅱ

（填“限制酶Ⅰ”或“限制酶Ⅱ”）進(jìn)行了切割；檢驗(yàn)重組載體導(dǎo)入能否成功需要利用

基因I

基因I

作為標(biāo)記基因。
（3）過(guò)程d通常采用

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化

方法，過(guò)程e運(yùn)用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得符合要求的個(gè)體。在該技術(shù)應(yīng)用的過(guò)程中，關(guān)鍵步驟是利用含有一定營(yíng)養(yǎng)和激素的培養(yǎng)基誘導(dǎo)植物細(xì)胞進(jìn)行

脫分化

脫分化

和

再分化

再分化

。