多聚酶鏈式反應（PCR）是一種體外迅速擴增DNA片段的技術；電泳技術是將待測樣品放在光滑的凝膠薄膜上，并加上直流電場，可利用分子帶電荷不同分離和分析氨基酸和多核苷酸片段等有機物。請回答有關這兩項技術的原理及應用問題。
（1）PCR利用DNA的熱變性原理解決了打開DNA雙鏈的問題，但又導致了DNA聚合酶失活的新問題。到20世紀80年代，科學家從一種Taq細菌中分離出耐高溫的DNA聚合酶（或Taq酶）耐高溫的DNA聚合酶（或Taq酶），它的發(fā)現(xiàn)解決了酶重復使用的難題，使鏈式反應成為可能。PCR的每次循環(huán)可以分為變性、復性和延伸變性、復性和延伸三步；要將Taq細菌從其他普通的微生物中分離出來，所用的培養(yǎng)基為選擇選擇培養(yǎng)基（按功能分）。
（2）電泳技術原理：在同一電場下，由于蛋白質或DNA的帶電性質帶電性質以及本身大小、形狀不同而產(chǎn)生不同的遷移方向或速度，從而實現(xiàn)樣品的分離。在電泳過程中，帶電分子會向著與其所帶電荷相反相反（ 填“相同”或“相反”）的電極移動。
如圖1為應用電泳方法和原理對核酸進行分析，請據(jù)圖分析回答有關問題。
（3）圖中被分析的材料應屬于一條DNA（單）DNA（單）鏈。如果選擇性斷開的位置是堿基G，那么隨機出現(xiàn)的被標記片段應有44種。在電泳帶上被分離的顯示位置應有44處。
（4）應用上述原理分析了某種未知序列核酸的一條單鏈，結果如圖2所示，此結果說明，該核酸的此單鏈含1818個核苷酸，其A：T：G：C=5：4：5：45：4：5：4。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】耐高溫的DNA聚合酶（或Taq酶）；變性、復性和延伸；選擇；帶電性質；相反；DNA（單）；4；4；18；5：4：5：4
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：11引用：2難度：0.6
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1．數(shù)字PCR技術是一種核酸分子絕對定量技術，其原理如圖所示。下列有關敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：6引用：2難度：0.6 -
2．PCR技術不僅可以擴增目的基因，還可用于定點誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點突變技術。大引物PCR需要用到引物進行兩次PCR，其操作步驟為：
①根據(jù)目的基因序列設計引物，得到兩個常規(guī)引物，分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物；
②根據(jù)突變堿基所處序列位置設計突變上游引物，突變位點位于突變引物序列的中間位置
③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進行第一次PCR反應得到下游大引物；
④用得到的下游大引物中和另一個常規(guī)上游引物進行第二次PCR擴增，得到突變目的基因序列?；卮鹣铝袉栴}：
（1）PCR擴增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關，DNA中G+C的含量越多，要求的變性溫度越高。其原因是。該PCR擴增技術所需的基本條件是種引物、原料、模板、。
（2）在第一次PCR反應中，形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過次復制。第一次PCR的產(chǎn)物DNA的條鏈作為第二次PCR所用的引物。與X射線誘變相比，該突變技術的優(yōu)點是。
（3）如果要利用微生物進一步克隆PCR定點誘變產(chǎn)物，其步驟包括：、、微生物的篩選和培養(yǎng)、從菌群中獲取更多目的基因。將獲取目的基因和質粒進行連接后，需先用處理農(nóng)桿菌以便將基因表達載體導入馬鈴薯細胞，將馬鈴薯細胞培養(yǎng)成幼苗時經(jīng)過的兩個過程是。檢測目的基因是否在馬鈴薯細胞中轉錄出了mRNA，所采用的方法是。發(fā)布：2024/12/30 23:0:2組卷：32引用：3難度：0.6 -
3．下列關于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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