研究人員利用小鼠（2N=40）的倍體ES細(xì)胞（只含一個(gè)染色體組），成功培育出轉(zhuǎn)基因小鼠。其主要技術(shù)流程如圖所示：
注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四種限制酶，箭頭指向的位置為限制酶的切割位置：Ampr是氨芐青霉素抗性基因Neor是G418抗性基因。
（1）重組質(zhì)粒上的抗生素抗性基因可作為標(biāo)記基因，其作用是重組DNA的鑒定和選擇重組DNA的鑒定和選擇。氨芐青霉素不能有效殺死小鼠細(xì)胞，而一定濃度的G418能有效殺死不具有Neor的小鼠細(xì)胞，結(jié)合如圖推測(cè)，過程①選用的兩種限制酶是Ⅰ和ⅡⅠ和Ⅱ（選填圖中的編號(hào)），圖中③處的培養(yǎng)液應(yīng)添加G418G418 （填“氨芐青霉素”或“G418“）。
（2）若圖中過程①選用的兩種限制酶識(shí)別序列和切制位置分別是
，則經(jīng)這兩種限制街切制后所產(chǎn)生的黏性末端是
，此時(shí)，圖中過程②應(yīng)選用T4DNA連接酶而不選E?coliDNA連接酶，原因是兩種限制酶切出的末端有黏性末端和平末端，T4DNA連接酶能連接平末端和黏性末端，E?coliDNA連接酶只能連接黏性末端兩種限制酶切出的末端有黏性末端和平末端，T4DNA連接酶能連接平末端和黏性末端，E?coliDNA連接酶只能連接黏性末端。圖中“轉(zhuǎn)化”是指目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程。
（3）據(jù)圖分析，細(xì)胞乙內(nèi)除線粒體DNA外，還有4040個(gè)DNA分子；細(xì)胞乙發(fā)育成桑葚胚的過程中細(xì)胞分裂方式是有絲分裂有絲分裂，將細(xì)胞乙培養(yǎng)成桑葚胚的技術(shù)稱為早期胚胎培養(yǎng)早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】重組DNA的鑒定和選擇；Ⅰ和Ⅱ；G418；；兩種限制酶切出的末端有黏性末端和平末端，T4DNA連接酶能連接平末端和黏性末端，E?coliDNA連接酶只能連接黏性末端；目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程；40；有絲分裂；早期胚胎培養(yǎng)
；兩種限制酶切出的末端有黏性末端和平末端，T4DNA連接酶能連接平末端和黏性末端，E?coliDNA連接酶只能連接黏性末端；目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程；40；有絲分裂；早期胚胎培養(yǎng)【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：8引用：2難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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