通過引物設(shè)計，運用PCR技術(shù)可以實現(xiàn)目的基因的定點誘變，如圖為基因工程中獲取突變基因的過程，其中引物1序列中含有一個堿基T不能與目的基因片段配對，但不影響引物與模板鏈的整體配對，反應(yīng)體系中引物1和引物2分別設(shè)計增加限制酶a和限制酶b的識別位點。有關(guān)敘述正確的是（　　）

A．限制酶a和限制酶b的識別位點分別加在引物1和引物2的3′端

B．PCR反應(yīng)體系中需要加入脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶、Ca²⁺等

C．第2輪PCR中，引物1與圖中②結(jié)合并形成兩條鏈等長的突變基因

D．在第3輪PCR結(jié)束后，含突變堿基對且兩條鏈等長的DNA占

【答案】D

【解答】

【點評】

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發(fā)布：2024/5/27 14:0:0組卷：42引用：2難度：0.6

相似題

1．農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA可以轉(zhuǎn)移并隨機插入到被侵染植物的染色體DNA中。研究者將圖中被侵染植物的DNA片段連接成環(huán)，并以此環(huán)為模板進行PCR，擴增出T-DNA插入位置兩側(cè)的未知序列，以此可確定T-DNA插入的具體位置。下列說法不正確的是（　?。?br />
注：子鏈從引物的3′端開始延伸

A．PCR擴增依據(jù)的是DNA分子雙鏈復制的原理

B．進行PCR擴增需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶

C．利用圖中的引物②、③組合可擴增出兩側(cè)的未知序列

D．通過與受體細胞的基因組序列比對，可確定T-DNA的插入位置

發(fā)布：2024/11/3 8:30:2組卷：101引用：6難度：0.7

A．利用DNA和蛋白質(zhì)在冷酒精中溶解性的差異可將DNA進一步純化分離

B．在提取白色絲狀物時雙向攪拌比單向攪拌更有利于獲得結(jié)構(gòu)完整的DNA

C．PCR實驗中使用的微量離心管、槍頭、蒸餾水和移液器等在使用前都必須進行高壓蒸汽滅菌處理

D．PCR的產(chǎn)物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定，電泳時電泳緩沖液不能沒過凝膠

發(fā)布：2024/11/4 8:0:35組卷：27引用：1難度：0.6

A．PCR所需引物和體內(nèi)DNA復制所需引物不同

B．引物長度和復性溫度均會影響PCR擴增的特異性

C．PCR產(chǎn)物電泳時的遷移速率與DNA分子的大小有關(guān)，與凝膠的濃度無關(guān)

D．PCR預變性的目的是增加大分子模板DNA徹底變性的概率

發(fā)布：2024/11/3 22:0:1組卷：9引用：2難度：0.7

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