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生物科技廣泛應用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)，以改善農(nóng)作物品質(zhì)、提高產(chǎn)量。植物成熟果實細胞中會表達大量的半乳糖醛酸酶（PG），導致成熟果實易于損傷?？茖W家利用番茄的PG基因構(gòu)建反義PG基因表達載體，導入番茄細胞，培育出轉(zhuǎn)基因延熟番茄。圖甲是反義PG基因的作用機理，圖乙是質(zhì)粒結(jié)構(gòu)圖及相應的酶切位點?；卮鹣铝袉栴}。
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（1）從番茄細胞中提取PG基因轉(zhuǎn)錄的mRNA，經(jīng)過
逆轉(zhuǎn)錄（或反轉(zhuǎn)錄）
逆轉(zhuǎn)錄（或反轉(zhuǎn)錄）
產(chǎn)生cDNA，再用
PCR
PCR
技術(shù)體外擴增。該技術(shù)需先設(shè)計合成
引物
引物
，并使用
熱穩(wěn)定性DNA聚合（Taq）
熱穩(wěn)定性DNA聚合（Taq）
酶來催化。
（2）構(gòu)建反義PG基因表達載體時需在啟動子和終止子之間反向插入PG基因。為使目的基因與質(zhì)粒正確連接，并提高兩者重組的成功率，需在擴增的目的基因兩端分別引入
BamHI和EcoRI
BamHI和EcoRI
（填“EcoRⅠ和EcoRⅠ”“BamHⅠ和BamHⅠ”或“BamHⅠ和EcoRⅠ”）限制酶的識別序列。質(zhì)粒上有標記基因，利用抗生素可篩選出含質(zhì)粒載體的宿主細胞，方法是
將待篩選的宿主細胞接種到含該抗生素的培養(yǎng)基中，能夠生長的是含有質(zhì)粒載體的宿主細胞
將待篩選的宿主細胞接種到含該抗生素的培養(yǎng)基中，能夠生長的是含有質(zhì)粒載體的宿主細胞
。
（3）用含反義PG基因的農(nóng)桿菌侵染番茄細胞，再通過
植物組織培養(yǎng)
植物組織培養(yǎng)
技術(shù)培育出轉(zhuǎn)基因番茄。在轉(zhuǎn)基因番茄中，反義PG基因能抑制PG合成的原因是阻斷了
PG基因表達過程中的翻譯階段
PG基因表達過程中的翻譯階段
。

【答案】逆轉(zhuǎn)錄（或反轉(zhuǎn)錄）；PCR；引物；熱穩(wěn)定性DNA聚合（Taq）；BamHI和EcoRI；將待篩選的宿主細胞接種到含該抗生素的培養(yǎng)基中，能夠生長的是含有質(zhì)粒載體的宿主細胞；植物組織培養(yǎng)；PG基因表達過程中的翻譯階段
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：26引用：2難度：0.5
相似題

  • 1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（　?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

  • 2．經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應，嚴重時甚至危及生命，因此必須對食品中生物胺的含量進行減控。微生物來源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)模化生產(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實現(xiàn)了高效表達。
    （1）通過上述基因工程技術(shù)獲取目標產(chǎn)物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是
     
    （填寫下列編號）。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)?；a(chǎn)目標蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細胞
    ⑤目的基因和運載體重組構(gòu)建表達載體
    （2）在PCR過程中，引物的功能是
     
    。
    A．啟動DNA復制
    B．規(guī)定擴增區(qū)間
    C．解旋DNA雙鏈
    D．充當復制模板
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    （3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設(shè)計的PCR引物應為圖甲中的
     
    。
    （4）獲取目的基因后，需要和載體重組導入受體細胞。載體的化學本質(zhì)是
     
    （填DNA或RNA/DNA或RNA）。
    （5）在常規(guī)PCR的每一輪擴增反應中，溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    （6）若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質(zhì)粒pCLY15（圖丙中圖1）需用
     
    和
     
    切開，才能與MCO片段高效連接。
    （7）下列實驗操作中，能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，用合適的限制酶切割
    B．在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑，以克隆的顏色進行鑒別
    C．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，以此為模板進行PCR檢測
    D．將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5

  • 3．用限制酶EcoRⅤ單獨切割某普通質(zhì)粒，可產(chǎn)生14kb（1kb即1000個堿基對）的長鏈，而同時用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒，可得到三種長度的DNA片段，見圖（其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個黏性末端）。
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    若用MboⅠ限制酶單獨切割該普通質(zhì)粒，則產(chǎn)生的DNA片段的長度為（　?。?/h2>

    發(fā)布：2024/11/14 4:0:2組卷：89引用：9難度：0.7
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