纖維素酶中的內(nèi)切葡聚糖酶能夠水解糖苷鍵,切割纖維素產(chǎn)生纖維二糖。研究人員構(gòu)建出能高效表達(dá)內(nèi)切葡聚糖酶的釀酒酵母工程菌,并應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)?;卮鹣铝袉栴}:
(1)纖維素經(jīng)酶切后得到纖維二糖,纖維二糖被
葡萄糖苷
葡萄糖苷
酶分解成葡萄糖。
(2)將酵母工程菌菌種接種于YPD培養(yǎng)基上培養(yǎng),培養(yǎng)基的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法
高壓蒸汽滅菌法
。YPD培養(yǎng)基的成分為酵母粉10 g(g?L-1)、蛋白胨20 g(g?L-1)、葡萄糖10 g(g?L-1),蒸餾水定容。培養(yǎng)基中的蛋白胨為菌種的生長(zhǎng)繁殖提供碳源、氮源和維生素
碳源、氮源和維生素
等營(yíng)養(yǎng)。擴(kuò)大培養(yǎng)菌種時(shí),控制150 r?min-1的轉(zhuǎn)速,有利于增加培養(yǎng)液的溶氧量、提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率
增加培養(yǎng)液的溶氧量、提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率
,從而促進(jìn)工程菌生長(zhǎng)繁殖。從培養(yǎng)液的離心上清液中收集內(nèi)切葡聚糖酶,說明該酶為分泌
分泌
(填“內(nèi)源”或“分泌”)蛋白。
(3)能高效表達(dá)內(nèi)切葡聚糖酶的釀酒酵母工程菌可利用秸稈發(fā)酵生產(chǎn)酒精,依據(jù)的原理是釀酒酵母工程菌產(chǎn)生的內(nèi)切葡聚糖酶能夠?qū)⒗w維素分解為葡萄糖,葡萄糖通過釀酒酵母工程菌的無氧呼吸生成酒精
釀酒酵母工程菌產(chǎn)生的內(nèi)切葡聚糖酶能夠?qū)⒗w維素分解為葡萄糖,葡萄糖通過釀酒酵母工程菌的無氧呼吸生成酒精
。進(jìn)行酒精發(fā)酵時(shí),除了控制無氧條件之外,還要注意控制溫度
溫度
等環(huán)境因素。