針對新冠病毒（SARS-CoV-2）的重組蛋白疫苗、核酸疫苗（包括 DNA疫苗和 RNA疫苗）等疫苗都在研發(fā)當中。如圖為其中一種疫苗的研發(fā)思路，圖中①～⑦表示過程，虛線箭頭表示 NcoⅠ、SphⅠ、NheI、BamHⅠ的酶切位點（四種酶的識別序列詳見表），標記基因 SUC2控制合成蔗糖酶，使 P型酵母菌能利用培養(yǎng)基中的蔗糖生存。
| 限制酶 | NcoⅠ | SphⅠ | NheⅠ | BamHⅠ |
| 識別序列和切割位點 | C↓CATGG | GCATG↓C | G↓GATCC | G↓CTAGC |
（1）圖中①過程需要使用
逆轉錄
逆轉錄
酶先得到cDNA，再使用 PCR（聚合酶鏈式反應）
PCR（聚合酶鏈式反應）
技術擴增得到S基因。（2）為使③過程順利進行，需先使用限制酶
Ncol
Ncol
和 Nhel
Nhel
切割質粒B，選用兩種限制酶對新冠病毒的S基因進行切割的目的是 防止S基因自身環(huán)化、防止S基因與運載體反向連接
防止S基因自身環(huán)化、防止S基因與運載體反向連接
（答出1點即可）。（3）圖中表示篩選的過程是
⑤
⑤
（填編號），篩選時應使用以 蔗糖
蔗糖
為唯一碳源的培養(yǎng)基。（4）重組疫苗注入志愿者體內(nèi)后，S蛋白基因指導合成的S蛋白作為
抗原
抗原
，刺激機體產(chǎn)生能與之相結合的抗體，抗體的分泌量可作為檢測疫苗對志愿者免疫效果的指標。參加臨床試驗的志愿者需要滿足的條件之一是 無
無
（選填“有”或“無”）SARS-C。V-2感染史，理由是 有SARS-CoV-2感染史的志愿者血清中會存在一定量的相應抗體，對試驗結果產(chǎn)生干擾
有SARS-CoV-2感染史的志愿者血清中會存在一定量的相應抗體，對試驗結果產(chǎn)生干擾
。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】逆轉錄；PCR（聚合酶鏈式反應）；Ncol；Nhel；防止S基因自身環(huán)化、防止S基因與運載體反向連接；⑤；蔗糖；抗原；無；有SARS-CoV-2感染史的志愿者血清中會存在一定量的相應抗體，對試驗結果產(chǎn)生干擾
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：77引用：4難度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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