抗凝血酶是一種天然抗凝血劑，在臨床上被廣泛應(yīng)用。目前科學(xué)家已在豬和羊等動物的乳腺生物反應(yīng)器中表達出了人的抗凝血酶，如圖是構(gòu)建抗凝血酶基因表達載體所用的pBR質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)及人抗凝血酶基因所在的DNA片段，回答下列問題：
（1）現(xiàn)有以下4種引物，引物A15'-GGACCCCGGG-3'；引物B：5'-CATTTCTAGA-3'；引物C：5'-CCTGGGGCCC-3'；引物D：5'-GTAAAGATCT-3'；，利用PCR擴增獲取抗凝血酶基因，應(yīng)選用引物 A和DA和D（填引物名稱），擴增產(chǎn)物可選擇限制酶 Xma I和BglⅡXma I和BglⅡ切割后再利用E?coliDNA連接酶連接到pBR質(zhì)粒上。
（2）所選用的pBR質(zhì)粒上含有啟動子，其作用是 RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄，將構(gòu)建的基因表達載體先導(dǎo)入大腸桿菌細胞，然后將大腸桿菌涂布到含新霉素的選擇培養(yǎng)基上，長出了多個大腸桿菌菌落，這些菌落并非都是目的菌株，原因是 導(dǎo)入不含目的基因（空載）的質(zhì)粒的大腸桿菌也可以在這種培養(yǎng)基上生長導(dǎo)入不含目的基因（空載）的質(zhì)粒的大腸桿菌也可以在這種培養(yǎng)基上生長。
（3）將篩選得到的目的菌株提取質(zhì)粒，再通過 顯微注射顯微注射方法導(dǎo)入到豬或羊的 受精卵受精卵細胞內(nèi)，通過培養(yǎng)即可獲得能表達人抗凝血酶的乳腺生物反應(yīng)器。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】A和D；Xma I和BglⅡ；RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄；導(dǎo)入不含目的基因（空載）的質(zhì)粒的大腸桿菌也可以在這種培養(yǎng)基上生長；顯微注射；受精卵
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：4引用：1難度：0.6
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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