科學(xué)家將人的α1-抗胰蛋白酶(α1-AT)基因與綿羊乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起,成功地培育出能表達(dá)α1-AT的轉(zhuǎn)基因綿羊,這標(biāo)志著乳腺生物反應(yīng)器的實(shí)用性研究進(jìn)入醫(yī)學(xué)臨床應(yīng)用。回答下列問題:
(1)從人的胸腺組織細(xì)胞中提取到α1-AT的mRNA,通過反轉(zhuǎn)錄獲得α1-AT基因,與人體細(xì)胞內(nèi)基因的結(jié)構(gòu)相比,該方法得到的基因不具有 啟動(dòng)子、終止子、內(nèi)含子等啟動(dòng)子、終止子、內(nèi)含子等(答兩點(diǎn))等。為獲得更多的α1-AT基因,可利用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增,該技術(shù)需要 22種引物,引物的作用是 使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開始連接脫氧核糖核苷酸使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開始連接脫氧核糖核苷酸。
(2)科學(xué)家將α1-AT基因與綿羊乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起,再與質(zhì)粒構(gòu)建成重組表達(dá)載體,而不是將α1-AT基因直接導(dǎo)入綿羊受精卵中,原因是 使a-AT基因能在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并可遺傳,同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用,若直接將其導(dǎo)入受體細(xì)胞,很可能會(huì)被降解使a-AT基因能在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并可遺傳,同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用,若直接將其導(dǎo)入受體細(xì)胞,很可能會(huì)被降解。表達(dá)載體中啟動(dòng)子的作用是 (RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位)能驅(qū)動(dòng)a-AT基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得a-AT(RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位)能驅(qū)動(dòng)a-AT基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得a-AT。
(3)將重組基因表達(dá)載體導(dǎo)入綿羊受精卵中,置于早期胚胎培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng)。早期胚胎進(jìn)行移植前,需進(jìn)行性別鑒定,若要在囊胚期鑒定性別,則操作思路是 取滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析性別鑒定取滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析性別鑒定。胚胎移植的實(shí)質(zhì)是 早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移。
(4)轉(zhuǎn)基因綿羊成年后需對(duì)其體內(nèi)α1-AT基因表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè),一般采用抗原—抗體雜交法,若出現(xiàn) 雜交帶雜交帶,則表明α1-AT基因成功表達(dá),轉(zhuǎn)基因綿羊培育成功。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合;基因工程的原理.
【答案】啟動(dòng)子、終止子、內(nèi)含子等;2;使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開始連接脫氧核糖核苷酸;使a-AT基因能在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并可遺傳,同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用,若直接將其導(dǎo)入受體細(xì)胞,很可能會(huì)被降解;(RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位)能驅(qū)動(dòng)a-AT基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得a-AT;取滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析性別鑒定;早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移;雜交帶
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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