長期高血糖可引發(fā)血管細胞衰老。科研人員為研究S蛋白在因高血糖引發(fā)的血管細胞衰老中的作用，以腺病毒為載體將編碼S蛋白的S基因導入血管細胞，實現(xiàn)S蛋白在血管細胞中的大量表達。腺病毒的遺傳物質為DNA，其復制需要E₁、E₂、E₃.基因共同完成。為將S基因導入腺病毒，科研人員首先構建了含S基因的重組質粒，過程如圖1所示。

（1）科研人員將S基因用

BamHⅠ和 EcoRⅠ

BamHⅠ和 EcoRⅠ

限制酶切割后，用DNA連接酶連入質粒Ⅰ，得到重組質粒Ⅰ（圖1甲所示），導入用CaCl₂處理制備的

感受態(tài)

感受態(tài)

細菌。用添加抗生紫的培養(yǎng)基篩選，對所長出的單菌落提取質粒，通過的方法可鑒定重組質粒Ⅰ是否插入了S基因。
（2）用PmeI酶切重組質粒Ⅰ獲得DNA片段。將此DNA片段與質粒Ⅱ（圖1乙所示）共同轉化為重組質粒Ⅱ（圖1丙所示）。使用添加的

卡那霉素

卡那霉素

的培養(yǎng)基可篩選得到成功導入重組質粒Ⅱ的菌落。
（3）將含S基因的重組質粒Ⅱ，用PacI酶切后，獲得改造后的腺病毒DNA。將其導入A細胞（A細胞含有E₃基因，可表達E₃蛋白），如圖2所示。腺病毒DNA在A細胞內能夠

復制并指導腺病毒外殼蛋白的合成

復制并指導腺病毒外殼蛋白的合成

，從而產生大量重組腺病毒，腺病毒進入宿主細胞后不整合到宿主細胞染色體上。用酶切時不能破壞啟動子，原因是啟動子是

RNA 聚合酶

RNA 聚合酶

識別和結合的部位，有了它才能驅動基因轉錄出mRNA。
（4）綜合上述信息，從生物安全性角度分析重組腺病毒載體的優(yōu)點：

重組腺病毒只能在A細胞中才能夠復制，即使侵染其他細胞，也不能復制；重組腺病毒進入宿主細胞后不整合到宿主細胞染色體上；腺病毒是人工改造的載體，不含致病基因

重組腺病毒只能在A細胞中才能夠復制，即使侵染其他細胞，也不能復制；重組腺病毒進入宿主細胞后不整合到宿主細胞染色體上；腺病毒是人工改造的載體，不含致病基因

（寫出1點）。