CAR-T細(xì)胞療法是通過設(shè)計CAR基因,并導(dǎo)入癌癥患者的T細(xì)胞中,使其轉(zhuǎn)化為CAR-T細(xì)胞,CAR-T細(xì)胞膜上的CAR蛋白與癌細(xì)胞表面抗原特異結(jié)合后,激活CAR-T細(xì)胞使其增殖、分化,從而實現(xiàn)對癌細(xì)胞的特異性殺傷和記憶,主要過程如圖。請回答:
(1)過程①中,需要先要用限制性內(nèi)切酶限制性內(nèi)切酶切割不同的DNA片段形成黏性末端,再利用DNA連接酶DNA連接酶連接形成CAR基因。
(2)將CAR基因?qū)牖颊逿細(xì)胞前,必須先完成過程②,一是因為CAR基因片段小,在細(xì)胞中容易丟失;二是因為缺少復(fù)制原點復(fù)制原點,XAR基因在T細(xì)胞中不能復(fù)制。
(3)完成過程③常用方法是顯微注射顯微注射。此外,還可以先將CAR基因整合到逆轉(zhuǎn)錄病毒載體中,再利用病毒的侵染侵染性導(dǎo)入并將CAR基因整合到T細(xì)胞的染色體DNA染色體DNA上。
(4)根據(jù)圖示,CAR-T細(xì)胞對癌細(xì)胞的特異性殺傷主要取決于CAR蛋白胞外結(jié)合胞外結(jié)合區(qū)。CAR-T細(xì)胞療法具有持久性是因為CAR-T細(xì)胞能夠在體內(nèi)形成記憶細(xì)胞形成記憶細(xì)胞。
【答案】限制性內(nèi)切酶;DNA連接酶;復(fù)制原點;顯微注射;侵染;染色體DNA;胞外結(jié)合;形成記憶細(xì)胞
【解答】
【點評】
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