我國(guó)餐廚垃圾占城市生活垃圾比重的37%～62%，垃圾廢液中富含淀粉、蛋白質(zhì)、脂類等有機(jī)物，丟棄處理是一種資源的浪費(fèi)，而且處理不當(dāng)還會(huì)滋生病原菌，污染環(huán)境。研究人員采集廢棄垃圾液通過生物工程技術(shù)分離出了能高效降解淀粉、蛋白質(zhì)、脂肪等成分的菌種制成復(fù)合微生物菌劑，實(shí)現(xiàn)垃圾無害化處理和資源化的高效利用。回答下列問題：
（1）菌種的選育。按照如圖1流程分別分離獲得高效分解淀粉、蛋白質(zhì)、脂肪的菌種：

①采集廢棄垃圾液作為分離樣本，給我們提供的取樣思路是

從菌種生存環(huán)境中取樣

從菌種生存環(huán)境中取樣

，土樣采集后進(jìn)行富集培養(yǎng)，目的是

對(duì)目標(biāo)菌種擴(kuò)增，提高其所占比例，有利于分離獲得菌種

對(duì)目標(biāo)菌種擴(kuò)增，提高其所占比例，有利于分離獲得菌種

。
②完成梯度稀釋后，菌種接種到平板上的過程需要使用的工具為

移液器和玻璃刮刀（涂布器，三角刮刀）

移液器和玻璃刮刀（涂布器，三角刮刀）

，與普通營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不同，廚余垃圾多來自烹飪余留，因此在分離培養(yǎng)基中宜提高

氯化鈉（高鹽）

氯化鈉（高鹽）

含量配制成

選擇性

選擇性

（功能）培養(yǎng)基，更能實(shí)現(xiàn)菌株的分離。純化培養(yǎng)采用的接種方法是

平板劃線法

平板劃線法

。
（2）廚余垃圾處理的混菌發(fā)酵。用上述方法分別選育出高效分解淀粉、蛋白質(zhì)和脂肪的菌種后，將三類菌按照一定的比例制成復(fù)合微生物菌劑，再將菌劑與經(jīng)過預(yù)處理的廚余垃圾混合發(fā)酵。
①發(fā)酵過程中影響垃圾分解效率的因素除溫度、pH、溶解氧等環(huán)境因素外，還有

菌種類型、菌種的配比、菌液濃度、垃圾種類、垃圾濃度等

菌種類型、菌種的配比、菌液濃度、垃圾種類、垃圾濃度等

（至少列舉2項(xiàng)）
②發(fā)酵過程不僅能將垃圾無害化，同時(shí)還能通過

沉淀、過濾、離心

沉淀、過濾、離心

技術(shù)從發(fā)酵液分離獲得豐富的單細(xì)胞蛋白，實(shí)現(xiàn)垃圾的資源化。
③收集微生物處理后的廚余垃圾殘?jiān)?，?jīng)晾曬干后制成飼料，可實(shí)現(xiàn)

能量的多級(jí)利用

能量的多級(jí)利用

，提高能量利用率。
（3）超級(jí)分解菌的培育。研究發(fā)現(xiàn)，混菌發(fā)酵過程中各種菌存在相互作用，導(dǎo)致分解效率低下，因此科研人員嘗試獲取能表達(dá)淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶的融合基因（圖2），利用一種高效表達(dá)質(zhì)粒的載體（圖3），將其導(dǎo)入到巨大芽孢桿菌中，提高廚余垃圾的分解率?，F(xiàn)有MspⅠ，BamHⅠ.Mbol、SmaⅠ、BglⅡ等限制酶，它們的識(shí)別序列和酶切位點(diǎn)分別為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG、A↓GATCT。
①分別選擇

Mbol和BamHI

Mbol和BamHI

酶切割融合基因和質(zhì)粒（各選用一種酶），然后使用

DNA連接

DNA連接

酶連接形成重組質(zhì)粒。若使用MspⅠ酶對(duì)重組質(zhì)粒進(jìn)行充分酶切，每個(gè)重組質(zhì)粒至少能水解為

3

3

個(gè)片段。
②采用感受態(tài)細(xì)胞法將重組質(zhì)粒導(dǎo)入巨大芽孢桿菌后，將受體菌培養(yǎng)在添加

抗生素B

抗生素B

的培養(yǎng)基進(jìn)行檢測(cè)篩選，即可獲得能同時(shí)高效降解廚余垃圾的超級(jí)分解菌。