轉(zhuǎn)座子是指能從基因組的一個(gè)位置移動(dòng)到另一個(gè)位置的DNA片段。Ac片段能編碼轉(zhuǎn)座酶可自主移動(dòng)。Ds片段需在轉(zhuǎn)座酶作用下，才可以從原來的位置上切離下來，然后隨機(jī)插入到所在染色體的其他位置或其他染色體上。
（1）用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶將DS片段構(gòu)建在Ti質(zhì)粒的T-DNA片段上，再用含有該重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻，自交篩選獲得DS-T-DNA純合體（甲）。以同樣方法獲得Ac-T-DNA純合體水稻（乙）。甲、乙雜交獲得Ac/Ds雙因子轉(zhuǎn)座系統(tǒng)水稻，在其后代中篩選到一些淡綠葉突變體。利用淡綠葉突變體與野生型水稻（甲）進(jìn)行系列雜交實(shí)驗(yàn)，F2F2代獲得野生型和淡綠葉水稻植株分別為442株和130株，分離比符合3：1，初步推測淡綠葉突變是單基因的 隱隱性突變。將442株野生型植株單株收獲和播種，后代發(fā)生性狀分離的植株占 2/32/3，則進(jìn)一步確認(rèn)上述推測。
（2）為進(jìn)一步確定突變性狀與Ds發(fā)生切離轉(zhuǎn)座的相關(guān)性，設(shè)計(jì)6種引物（如圖1），對上述572株子代的T-DNA進(jìn)行PCR檢測。
①檢測原理：Ds未發(fā)生切離的DNA位點(diǎn)，通過引物 b和db和d可得到400bp的擴(kuò)增產(chǎn)物；Ds已發(fā)生切離的DNA位點(diǎn)通過引物 c和dc和d可得到870bp的擴(kuò)增產(chǎn)物。
②擴(kuò)增產(chǎn)物的電泳結(jié)果如圖2，據(jù)此判斷 BB類型為淡綠葉突變體。若A類型：B類型：C類型=2：1：12：1：1，則突變性狀產(chǎn)生與Ds片段的切離轉(zhuǎn)座有關(guān)。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定；基因的分離定律的實(shí)質(zhì)及應(yīng)用．
【答案】F2；隱；2/3；b和d；c和d；B；2：1：1
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/5/11 8:0:9組卷：18引用：1難度：0.5
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：6引用：2難度：0.6 -
2．PCR技術(shù)不僅可以擴(kuò)增目的基因，還可用于定點(diǎn)誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點(diǎn)突變技術(shù)。大引物PCR需要用到引物進(jìn)行兩次PCR，其操作步驟為：
①根據(jù)目的基因序列設(shè)計(jì)引物，得到兩個(gè)常規(guī)引物，分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物；
②根據(jù)突變堿基所處序列位置設(shè)計(jì)突變上游引物，突變位點(diǎn)位于突變引物序列的中間位置
③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進(jìn)行第一次PCR反應(yīng)得到下游大引物；
④用得到的下游大引物中和另一個(gè)常規(guī)上游引物進(jìn)行第二次PCR擴(kuò)增，得到突變目的基因序列。回答下列問題：
（1）PCR擴(kuò)增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關(guān)，DNA中G+C的含量越多，要求的變性溫度越高。其原因是。該P(yáng)CR擴(kuò)增技術(shù)所需的基本條件是種引物、原料、模板、。
（2）在第一次PCR反應(yīng)中，形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過次復(fù)制。第一次PCR的產(chǎn)物DNA的條鏈作為第二次PCR所用的引物。與X射線誘變相比，該突變技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是。
（3）如果要利用微生物進(jìn)一步克隆PCR定點(diǎn)誘變產(chǎn)物，其步驟包括：、、微生物的篩選和培養(yǎng)、從菌群中獲取更多目的基因。將獲取目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行連接后，需先用處理農(nóng)桿菌以便將基因表達(dá)載體導(dǎo)入馬鈴薯細(xì)胞，將馬鈴薯細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗時(shí)經(jīng)過的兩個(gè)過程是。檢測目的基因是否在馬鈴薯細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄出了mRNA，所采用的方法是。發(fā)布：2024/12/30 23:0:2組卷：32引用：3難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯(cuò)誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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