將外源多酚氧化酶基因（POT33）的同源片段與載體結(jié)合，構(gòu)建反義表達載體，通過基因工程技術(shù)導入馬鈴薯，產(chǎn)生的反義RNA可有效降低馬鈴薯內(nèi)源多酚氧化酶基因的表達水平，從而改善薯塊的損傷褐化現(xiàn)象，提高馬鈴薯的食用和加工品質(zhì)?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問題：
（1）獲取馬鈴薯POT33基因的同源片段：根據(jù)馬鈴薯POT33基因的 核苷酸的排列順序核苷酸的排列順序設(shè)計一對特異性引物，在引物的5′端加入限制性內(nèi)切核酸酶的 識別序列識別序列以滿足目的基因連接到載體的需要，再通過PCR獲取馬鈴薯POT33基因的同源片段。
（2）構(gòu)建重組載體：用限制性內(nèi)切核酸酶分別處理 目的基因和載體目的基因和載體，處理過程中用兩種限制酶，可以防止目的基因以及載體的 自身環(huán)化自身環(huán)化，保證POT33基因同源片段與載體的反向連接，形成反義表達載體。
（3）馬鈴薯轉(zhuǎn)化、選擇及再生：以馬鈴薯無菌苗的葉片為外植體，一般可借助 農(nóng)桿菌農(nóng)桿菌實現(xiàn)馬鈴薯的遺傳轉(zhuǎn)化，再將被轉(zhuǎn)化的葉片放在含抗生素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，加入的抗生素具有篩選轉(zhuǎn)化細胞和 殺滅農(nóng)桿菌殺滅農(nóng)桿菌的雙重作用；之后對脫分化形成的愈傷組織每隔適當時間進行 繼代繼代培養(yǎng)，后可通過調(diào)控培養(yǎng)基中 植物生長調(diào)節(jié)劑和營養(yǎng)物質(zhì)的種類和濃度植物生長調(diào)節(jié)劑和營養(yǎng)物質(zhì)的種類和濃度以獲得符合要求的再生植株。
【考點】基因工程的操作過程綜合；植物的組織培養(yǎng)．
【答案】核苷酸的排列順序；識別序列；目的基因和載體；自身環(huán)化；農(nóng)桿菌；殺滅農(nóng)桿菌；繼代；植物生長調(diào)節(jié)劑和營養(yǎng)物質(zhì)的種類和濃度
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：9引用：1難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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