番茄紅素具有一定的抗癌效果,但在番茄紅素環(huán)化酶的催化作用下,易轉(zhuǎn)化為胡蘿卜素,科學(xué)家利用基因工程設(shè)計了重組DNA(質(zhì)粒三),并導(dǎo)入番茄細胞,從而阻止番茄紅素的轉(zhuǎn)化,提高番茄紅素的產(chǎn)量,下圖為利用質(zhì)粒一和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒三的過程示意圖,請回答下列問題
(1)該過程中用到的工具有限制酶、DNA連接酶、運載體(質(zhì)粒)限制酶、DNA連接酶、運載體(質(zhì)粒),圖中“目的基因”是番茄紅素環(huán)化酶番茄紅素環(huán)化酶基因。
(2)先構(gòu)建“質(zhì)粒二”的原因主要是利用質(zhì)粒二中含有BamHⅠ和Ecl酶的識別序列(和切割位點)BamHⅠ和Ecl酶的識別序列(和切割位點),利用限制酶BamH I開環(huán)后去磷酸化的目的是防止自身環(huán)化防止自身環(huán)化,再利用BamH I及Ecl酶切的目的是確保目的基因反向連接確保目的基因反向連接。
(3)質(zhì)粒三導(dǎo)入受體細胞并表達后,行成雙鏈RNA(發(fā)卡)的原因是轉(zhuǎn)錄后的RNA分子中存在互補配對的堿基序列轉(zhuǎn)錄后的RNA分子中存在互補配對的堿基序列?!鞍l(fā)卡”在受體細胞內(nèi)可以阻止翻譯翻譯過程,從而使基因“沉默”。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】限制酶、DNA連接酶、運載體(質(zhì)粒);番茄紅素環(huán)化酶;BamHⅠ和Ecl酶的識別序列(和切割位點);防止自身環(huán)化;確保目的基因反向連接;轉(zhuǎn)錄后的RNA分子中存在互補配對的堿基序列;翻譯
【解答】
【點評】
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