埃博拉病毒(EBOV)是一種能導(dǎo)致人類出血熱的致死性病毒,威脅人類健康。EBOV的NP蛋白在病毒復(fù)制中具有重要作用,也是檢測EBOV的重要靶蛋白。實驗人員用NP蛋白免疫小鼠來制備抗EBOV單克隆抗體,過程如圖1所示?;卮鹣铝袉栴}:
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(1)制備單克隆抗體涉及的細胞工程技術(shù)有 動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合(答出2點)。體外培養(yǎng)骨髓瘤細胞時,應(yīng)該在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加 血清血清以補充細胞生長所需的未知營養(yǎng)物質(zhì)。
(2)使用特定的選擇培養(yǎng)基經(jīng)篩選1獲得雜交瘤細胞時,通過該培養(yǎng)基可以淘汰 未融合的親本細胞和融合的具有同種核的(B細胞、骨髓瘤細胞和自身融合細胞)未融合的親本細胞和融合的具有同種核的(B細胞、骨髓瘤細胞和自身融合細胞)細胞。篩選2含多次篩選,篩選所依據(jù)的基本原理是 抗原與抗體特異性結(jié)合抗原與抗體特異性結(jié)合。兩次篩選后的所需細胞群應(yīng)具備的特點是 既能無限增殖,又能產(chǎn)生所需抗體既能無限增殖,又能產(chǎn)生所需抗體。
(3)抗EBOV單克隆抗體可用于檢測血漿中EBOV的含量,檢測原理如圖2所示。
①檢測前,先將抗EBOV單克隆抗體固定在支持物上,然后向檢測體系中加入一定量含有EBOV的血漿(其NP蛋白稱為待測抗原)和等量酶標(biāo)記的NP蛋白(酶標(biāo)記抗原),目的是讓待測抗原、酶標(biāo)記抗原與抗EBOV單克隆抗體 競爭性競爭性結(jié)合。
②保溫一段時間后洗滌,再向檢測體系中加入一定量的白色底物,若檢測體系藍色越深,則說明血漿中EBOV的含量 越少越少。
【考點】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合;血清;未融合的親本細胞和融合的具有同種核的(B細胞、骨髓瘤細胞和自身融合細胞);抗原與抗體特異性結(jié)合;既能無限增殖,又能產(chǎn)生所需抗體;競爭性;越少
【解答】
【點評】
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