幾丁質是構成植物病原真菌和昆蟲外骨骼的組分,高等動植物和人類體內(nèi)不含幾丁質。某些微生物能合成幾丁質酶(胞外酶),將幾丁質降解為N-乙酰氨基葡萄糖。科研人員通過微生物培養(yǎng)獲得幾丁質酶,用于生物防治?;卮鹣铝袉栴}。
(1)幾丁質酶用于植物病蟲害防治的優(yōu)勢是 無毒、無污染無毒、無污染。
(2)欲篩選幾丁質酶高產(chǎn)菌株,應在培養(yǎng)基中加入幾丁質,為微生物提供 碳源、氮源碳源、氮源。菌株接種前對培養(yǎng)基滅菌,殺死培養(yǎng)基內(nèi)外 所有的微生物,包括芽孢和孢子所有的微生物,包括芽孢和孢子。菌株篩選成功后,可將培養(yǎng)的菌液與滅菌后的 甘油甘油混合,在-20℃長期保存。
(3)將篩選出的菌株接種到培養(yǎng)基中,30℃恒溫振蕩培養(yǎng)至幾丁質降解完全,得到幾丁質酶發(fā)酵液,將其離心,保留 上清液上清液(填“上清液”或“沉淀”),獲得粗酶樣品;在膠體幾丁質固體培養(yǎng)基上打孔,將粗酶樣品加入孔內(nèi),恒溫靜置8h,根據(jù)透明圈的大小可判 幾丁質酶活力的高低幾丁質酶活力的高低。
(4)通過SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳聚丙烯酰胺凝膠電泳 法進行幾丁質酶樣品純度檢測,加入SDS的目的是 使蛋白質發(fā)生完全變性;消除凈電荷對遷移率的影響使蛋白質發(fā)生完全變性;消除凈電荷對遷移率的影響。
【答案】無毒、無污染;碳源、氮源;所有的微生物,包括芽孢和孢子;甘油;上清液;幾丁質酶活力的高低;聚丙烯酰胺凝膠電泳;使蛋白質發(fā)生完全變性;消除凈電荷對遷移率的影響
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:9引用:1難度:0.6
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