基因工程抗體又稱重組抗體，是指利用重組DNA及蛋白質工程技術對編碼抗體的基因按不同需要進行加工改造和重新裝配，經(jīng)轉染適當?shù)氖荏w細胞所表達的抗體分子。如圖1為某研究所制備小鼠抗甲肝病毒抗體的流程圖?；卮鹣铝袉栴}。
（1）實驗室構建重組質粒時，為保證目的基因與載體的正確連接，過程①最好選擇的限制酶是EcoRⅠ和BamHIEcoRⅠ和BamHI。
（2）在重組質粒中，目的基因首端的啟動子能夠與RNA聚合酶結合與RNA聚合酶結合，從而驅動目的基因的轉錄。除啟動子之外，重組質粒還應該包含終止子、目的基因、標記基因（復制原點）終止子、目的基因、標記基因（復制原點）。
（3）為了篩選出導入目的基因的骨髓瘤細胞，可以在過程③的培養(yǎng)液中添加（適量的）青霉素（適量的）青霉素，過程③所獲得的細胞具有既能大量增殖，又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體（抗甲肝病毒抗體）既能大量增殖，又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體（抗甲肝病毒抗體）的特點。
（4）臨床試驗發(fā)現(xiàn)，過程⑤提取的小鼠抗甲肝病毒抗體具有外源性，容易被人體的免疫系統(tǒng)清除，從而導致其治療效果大大降低。如圖2抗體中的A區(qū)是與抗原特異性結合的區(qū)域，B區(qū)是引起人體免疫反應的區(qū)域。若要避免小鼠抗甲肝病毒抗體被人體免疫系統(tǒng)清除，請?zhí)岢龊侠淼母脑焖悸?!--BA-->采用蛋白質工程技術將小鼠抗甲肝病毒抗體上B區(qū)域進行改造，或替換成人體相應抗體的B區(qū)，進而降低人體對該抗體的免疫排斥采用蛋白質工程技術將小鼠抗甲肝病毒抗體上B區(qū)域進行改造，或替換成人體相應抗體的B區(qū)，進而降低人體對該抗體的免疫排斥。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】EcoRⅠ和BamHI；與RNA聚合酶結合；終止子、目的基因、標記基因（復制原點）；（適量的）青霉素；既能大量增殖，又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體（抗甲肝病毒抗體）；采用蛋白質工程技術將小鼠抗甲肝病毒抗體上B區(qū)域進行改造，或替換成人體相應抗體的B區(qū)，進而降低人體對該抗體的免疫排斥
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：34引用：2難度：0.7
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1．基因工程技術又稱為DNA重組技術，回答相關問題：
（1）在基因工程中，獲取目的基因主要有兩大途徑，即和從中分離．
（2）利用某植物的成熟葉片為材料，同時構建cDNA文庫和基因組文庫，兩個文庫相比，cDNA文庫中含有的基因數(shù)目比基因組文庫中的少，其原因是．
（3）在基因表達載體中，啟動子是聚合酶識別并結合的部位．若采用原核生物作為基因表達載體的受體細胞，最常用的原核生物是．
（4）將目的基因導入植物細胞時，采用最多的方法是法．發(fā)布：2024/12/29 8:0:2組卷：2引用：1難度：0.3 -
2．科研人員利用大腸桿菌構建了抗蟲基因文庫。最新研究發(fā)現(xiàn)漏斗蜘蛛中的AH基因控制合成的毒素肽具有顯著的殺蟲效果，現(xiàn)以p-B質粒為載體，構建 AH基因的cDNA文庫。圖1表示p-B質粒，其中Cm/表示氯霉素抗性基因，cdB 基因表達產(chǎn)物能抑制大腸桿菌 DNA 復制。圖中箭頭表示相關限制酶的酶切位點，且不同種限制酶識別序列不同，其中AiuI、XbaI、SspI和MfeⅠ識別的堿基序列和酶切位點分別是 AG'CT、T'CTAGA、AAT'ATT、C'AATTG。請分析并回答下列問題：
（1）為獲得AH基因的cDNA，先要從漏斗蜘蛛毒素肽分泌細胞中提取，再通過合成出AH基因的cDNA。若從漏斗蜘蛛其他組織細胞提取，則難以成功，原因是。
（2）若已知AH基因的cDNA兩端部分序列為：5'-AACTATGCGC……CGTAGCCTCT-3'，請寫出PCR擴增該cDNA時的兩個引物對應的局部序列（前10個堿基序列），并標明5'和3'端：，。一個初始雙鏈cDNA經(jīng)四輪循環(huán)后，共消耗這兩種引物的數(shù)量為個。
（3）利用圖中的質粒和AH基因構建重組質粒時，宜選用限制酶雙酶切質粒，再選用限制酶切割目的基因，將切割后獲得的DNA片段混合，經(jīng)DNA連接酶處理后，再與大腸桿菌混合培養(yǎng)，在含有適量氯霉素的培養(yǎng)基中添加適量冷的，以促進轉化。
（4）經(jīng)上述處理培養(yǎng)后，其中能繁殖的大腸桿菌中應含有的質粒是，原因是。發(fā)布：2024/12/29 8:0:2組卷：8引用：1難度：0.6 -
3．基因治療是指將外源正?；驅氚屑毎?，以糾正或補償因基因缺陷和異常引起的疾病，以達到治療的目的．干擾素基因缺失的小鼠不能產(chǎn)生成熟淋巴細胞，科研人員利用胚胎干細胞（ES細胞）對干擾素基因缺失的小鼠進行了基因治療．請回答：
（1）為使干擾素基因在小鼠細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入基因表達載體的和之間．
（2）將干擾素基因導入ES細胞的方法是，采用可以鑒定目的基因是否插入到受體細胞染色體DNA分子上，再將能正常表達干擾素的細胞轉入到小鼠體內，這種治療方法稱為．導入ES細胞而不是導入上皮細胞是因為ES細胞在功能上具有．
（3）干擾素基因缺失的小鼠易患某種細菌導致的肺炎，引起這種現(xiàn)象的原因是小鼠缺少成熟的淋巴細胞，降低了小鼠免疫系統(tǒng)的功能．
（4）用于基因治療的基因有三類，一類是把正?；驅胗谢蛉毕莸募毎?，以表達出正常性狀來治療，第二類是反義基因，即通過產(chǎn)生的mRNA分子與病變基因產(chǎn)生的進行互補結合，來阻斷非正常蛋白質的合成；第三類是編碼可以殺死癌細胞的蛋白酶基因．發(fā)布：2024/12/29 8:0:2組卷：24引用：2難度：0.5
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