刺突糖蛋白（S蛋白）是新冠病毒入侵人體細胞及決定其抗原性的關鍵蛋白質。新冠病毒進入人體后，S蛋白與人體細胞表面的血管緊張素轉化酶2（ACE2）結合，從而侵入細胞內，某科研團隊利用改造的腺病毒為載體，通過基因工程的技術手段，將腺病毒的一部分基因替換成新冠病毒的S蛋白基因，進行疫苗研發(fā)。回答下列問題：
（1）選用的腺病毒需要經(jīng)過人工改造后，才能作為制備該疫苗的載體。改造后的腺病毒除了具有對宿主細胞無害、能夠在細胞中自我復制的特點外，還應該具有

（一至多個）限制酶切割位點

（一至多個）限制酶切割位點

、

標記基因

標記基因

等。
（2）在制備疫苗的過程中，常采用技術

PCR

PCR

獲取和擴增新冠病毒的S蛋白基因。擴增時，除了模板、四種脫氧核苷酸，還需要加入

Taq酶（或耐高溫的DNA聚合酶）

Taq酶（或耐高溫的DNA聚合酶）

和引物。加入的引物需要兩種的理由是

DNA的兩條鏈是反向平行的，DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈，用兩種引物才能確保DNA的兩條鏈同時被擴增

DNA的兩條鏈是反向平行的，DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈，用兩種引物才能確保DNA的兩條鏈同時被擴增

。
（3）在將腺病毒的一部分基因替換成新冠病毒的S蛋白基因的過程中，需要用到的酶是

限制酶

限制酶

 和

DNA連接酶

DNA連接酶

。
（4）該疫苗的前期臨床研究表明，接種疫苗后人體內產(chǎn)生了針對S蛋白的抗體，當新冠病毒侵染到接種過疫苗的人體內后，無法侵入到人體細胞進行繁殖，其原因是

當新冠病毒侵入機體后，該抗體能夠識別新冠病毒的S蛋白，并與之結合，導致病毒S蛋白無法和細胞表面的血管緊張素轉化酶2（ACE2）結合，病毒無法侵入人體細胞，從而失去增殖能力

當新冠病毒侵入機體后，該抗體能夠識別新冠病毒的S蛋白，并與之結合，導致病毒S蛋白無法和細胞表面的血管緊張素轉化酶2（ACE2）結合，病毒無法侵入人體細胞，從而失去增殖能力

。