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重組人胰島素是世界上第一個(gè)基因工程藥物，它的使用造福了億萬糖尿病患者。興趣小組探究工程菌的構(gòu)建，實(shí)驗(yàn)所用質(zhì)粒載體如圖所示，其中LacZ基因的表達(dá)產(chǎn)物能將無色反應(yīng)物X-gal水解，從而使菌落呈藍(lán)色，否則菌落呈現(xiàn)白色；Ampr基因的表達(dá)產(chǎn)物分泌到細(xì)胞外發(fā)揮作用。本實(shí)驗(yàn)所用的受體大腸桿菌無LacZ基因。
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（1）將表達(dá)載體轉(zhuǎn)入大腸桿菌細(xì)胞最常用的轉(zhuǎn)化方法是：一般先用Ca2+處理細(xì)胞，使細(xì)胞處于
一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子
一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子
的生理狀態(tài)，然后再將重組的基因表達(dá)載體導(dǎo)入其中。
（2）雙重篩選培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入
氨芐青霉素
氨芐青霉素
用以篩選出導(dǎo)入了質(zhì)粒載體的受體菌（轉(zhuǎn)化子），培養(yǎng)基中加入
X-gal
X-gal
用以鑒別出含重組質(zhì)粒的受體菌（重組子）。重組子的菌落顏色是
白色
白色
，原因是
重組子因LacZ基因被破壞，無法合成水解X-gal的酶，菌落呈白色
重組子因LacZ基因被破壞，無法合成水解X-gal的酶，菌落呈白色
。
（3）長時(shí)間培養(yǎng)后，培養(yǎng)基中轉(zhuǎn)化子形成的菌落周圍出現(xiàn)了一些非轉(zhuǎn)化子形成的較小菌落，這些非轉(zhuǎn)化子菌落形成的原因是
培養(yǎng)時(shí)間過長，Ampr基因（抗性基因）的表達(dá)產(chǎn)物分泌積累，使周圍培養(yǎng)基氨芐青霉素失效
培養(yǎng)時(shí)間過長，Ampr基因（抗性基因）的表達(dá)產(chǎn)物分泌積累，使周圍培養(yǎng)基氨芐青霉素失效
。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子；氨芐青霉素；X-gal；白色；重組子因LacZ基因被破壞，無法合成水解X-gal的酶，菌落呈白色；培養(yǎng)時(shí)間過長，Ampr基因（抗性基因）的表達(dá)產(chǎn)物分泌積累，使周圍培養(yǎng)基氨芐青霉素失效
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/5/28 8:0:9組卷：0引用：2難度：0.5
相似題

  • 1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（　?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

  • 2．經(jīng)由食物攝取過量生物胺會(huì)引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應(yīng)，嚴(yán)重時(shí)甚至危及生命，因此必須對食品中生物胺的含量進(jìn)行減控。微生物來源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)?；a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)了高效表達(dá)。
    （1）通過上述基因工程技術(shù)獲取目標(biāo)產(chǎn)物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是
     
    （填寫下列編號）。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細(xì)胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)?；a(chǎn)目標(biāo)蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
    ⑤目的基因和運(yùn)載體重組構(gòu)建表達(dá)載體
    （2）在PCR過程中，引物的功能是
     
    。
    A．啟動(dòng)DNA復(fù)制
    B．規(guī)定擴(kuò)增區(qū)間
    C．解旋DNA雙鏈
    D．充當(dāng)復(fù)制模板
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    （3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設(shè)計(jì)的PCR引物應(yīng)為圖甲中的
     
    。
    （4）獲取目的基因后，需要和載體重組導(dǎo)入受體細(xì)胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是
     
    （填DNA或RNA/DNA或RNA）。
    （5）在常規(guī)PCR的每一輪擴(kuò)增反應(yīng)中，溫度隨時(shí)間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    （6）若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質(zhì)粒pCLY15（圖丙中圖1）需用
     
    和
     
    切開，才能與MCO片段高效連接。
    （7）下列實(shí)驗(yàn)操作中，能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，用合適的限制酶切割
    B．在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑，以克隆的顏色進(jìn)行鑒別
    C．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，以此為模板進(jìn)行PCR檢測
    D．將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5

  • 3．用限制酶EcoRⅤ單獨(dú)切割某普通質(zhì)粒，可產(chǎn)生14kb（1kb即1000個(gè)堿基對）的長鏈，而同時(shí)用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒，可得到三種長度的DNA片段，見圖（其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個(gè)黏性末端）。
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    若用MboⅠ限制酶單獨(dú)切割該普通質(zhì)粒，則產(chǎn)生的DNA片段的長度為（　?。?/h2>

    發(fā)布：2024/11/14 4:0:2組卷：89引用：9難度：0.7
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