科研工作者將TaNHX2基因轉移到某植物細胞內，獲得了轉基因耐鹽植株新品種。如圖是獲取的含有目的基因的DNA片段，Sau3AI、EcoRI、BamHI三種限制性核酸內切酶的識別序列分別是↓GATC，G↓AATTC，G↓GATCC，質粒上各有一個Sau3AI和EcoRI的酶切位點。請分析并回答下列問題：
（1）若用BamHI切割圖中所示的DNA片段獲得了目的基因，則選用限制酶Sau3AISau3AI切割質粒，以便構建重組質粒，該方案的缺陷是會出現目的基因和質粒的自我環(huán)化以及目的基因在質粒上的連接方向不確定目的基因在質粒上的連接方向不確定。故切割圖中所示的DNA片段的最佳方案是選用限制酶EcoRI和BamHIEcoRI和BamHI。
（2）實驗中酶作用的強弱可用酶活性來表示，通常，酶活性的高低可用單位時間內單位體積中反應物的消耗量或產物的增加量單位時間內單位體積中反應物的消耗量或產物的增加量來表示。
（3）若采用農桿菌轉化法將目的基因（TaNHX2基因）導入原生質體，請寫出主要操作流程：先要將目的基因插入農桿菌Ti質粒的T-DNA中，然后用該農桿菌感染植物細胞先要將目的基因插入農桿菌Ti質粒的T-DNA中，然后用該農桿菌感染植物細胞。
原生質體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇，其作用是維持一定的滲透壓，保持原生質體的形態(tài)維持一定的滲透壓，保持原生質體的形態(tài)。
（4）為了從個體水平檢測成果，需要進行的操作是轉基因植株種植在鹽堿地，觀察其生長狀況轉基因植株種植在鹽堿地，觀察其生長狀況。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】Sau3AI；目的基因在質粒上的連接方向不確定；EcoRI和BamHI；單位時間內單位體積中反應物的消耗量或產物的增加量；先要將目的基因插入農桿菌Ti質粒的T-DNA中，然后用該農桿菌感染植物細胞；維持一定的滲透壓，保持原生質體的形態(tài)；轉基因植株種植在鹽堿地，觀察其生長狀況
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：30引用：3難度：0.6
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6