M 基因編碼的M蛋白在動物A的肝細(xì)胞中特異性表達?，F(xiàn)設(shè)計實驗，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通過核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動物A，流程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：
（1）傳統(tǒng)的細(xì)胞核移植技術(shù)中，受體卵母細(xì)胞普遍使用

顯微操作

顯微操作

方法去核，所去的“核”是指

紡錘體-染色體復(fù)合物

紡錘體-染色體復(fù)合物

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（2）在無菌、無毒等適宜環(huán)境中進行動物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時，需要定期更換培養(yǎng)液，目的是

清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害

清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害

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（3）與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比，體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率更低，原因是

動物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對容易，動物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難

動物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對容易，動物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難

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（4）為了獲得更多的克隆動物A，可在胚胎移植前進行分割，分割胚胎時要注意

均等分割內(nèi)細(xì)胞團

均等分割內(nèi)細(xì)胞團

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（5）鑒定轉(zhuǎn)基因動物：以免疫小鼠的

B

B

淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進行融合，篩選融合雜種細(xì)胞，制備M蛋白的單克隆抗體。簡要寫出利用此抗體確定克隆動物A中M基因是否失活的實驗思路

取動物A和克隆動物A的肝組織細(xì)胞，分別提取蛋白質(zhì)進行抗原-抗體雜交

取動物A和克隆動物A的肝組織細(xì)胞，分別提取蛋白質(zhì)進行抗原-抗體雜交

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