我國絨山羊所產(chǎn)的羊絨因品質(zhì)優(yōu)秀被譽為“軟黃金”而暢銷全球。胸腺素β4（Tβ4）是動物體內(nèi)一種分布廣泛的多肽，可促進動物毛發(fā)生長。研究者利用基因編輯技術將Tβ4基因定點整合到絨山羊基因組中，獲得新型絨山羊，部分操作過程如圖所示，回答下列問題：

（1）若獲取的Tβ4基因含有非編碼區(qū)和內(nèi)含子序列，則該基因是從

基因組

基因組

文庫中獲取的，獲取后利用PCR技術對其進行擴增時，需要向反應體系中加入四種dNTP、

Tβ4基因（或目的基因）、引物、Taq酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）

Tβ4基因（或目的基因）、引物、Taq酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）

（寫3種物質(zhì)）等物質(zhì)。
（2）擴增后的Tβ4基因與質(zhì)粒結(jié)合構建基因表達載體的過程需要用到的工具酶有

限制酶、DNA連接酶

限制酶、DNA連接酶

，通過培養(yǎng)整合有Tβ4基因的受體細胞獲得Tβ4基因定點整合的單克隆細胞群，該過程需要在

5%CO₂和95%空氣

5%CO₂和95%空氣

氣體環(huán)境中培養(yǎng)，且需要定期更換培養(yǎng)液，其目的是

防止細胞代謝產(chǎn)生的有害物質(zhì)影響細胞增殖（或補充營養(yǎng)物質(zhì)、創(chuàng)造無菌、無毒環(huán)境）

防止細胞代謝產(chǎn)生的有害物質(zhì)影響細胞增殖（或補充營養(yǎng)物質(zhì)、創(chuàng)造無菌、無毒環(huán)境）

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（3）圖中X為

去核的（MⅡ）卵母

去核的（MⅡ）卵母

細胞，獲得的重構胚（重組細胞）需要繼續(xù)培養(yǎng)至

桑葚胚或囊胚

桑葚胚或囊胚

階段，再將其移植到受體母羊體內(nèi)，從而獲得T4基因定點整合的羔羊。但該技術的成功率非常低，獲得的Tβ4基因定點整合的絨山羊數(shù)量較少，若要快速、大量繁育Tβ4基因定點整合的絨山羊，可以使用的現(xiàn)代生物技術有

體外受精、超數(shù)排卵、胚胎分割（移植）

體外受精、超數(shù)排卵、胚胎分割（移植）

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