纖維素是一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物，在地球上含量豐富。土壤中某些微生物能夠產生纖維素酶分解利用纖維素，幫助人們利用秸稈等廢棄物生產酒精，用纖維素酶處理服裝面料等。某科研小組為了將土壤中的分解纖維素細菌純化培養(yǎng)，進行了如下操作。請回答相關問題：

成分	纖維素粉	NANO3	NaHPO4?7H2O	KH2PO4	MgSO4?7H2O	KCl	酵母膏	水解酪素
含量（g）	5.0	1.0	1.2	0.9	0.5	0.5	0.5	0.5
操作	將上述物質溶解后，用蒸餾水定容到1000mL

（1）如表是纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基配方，若根據(jù)物理性質劃分，該培養(yǎng)基屬于

液體

液體

培養(yǎng)基。在微生物培養(yǎng)的過程中，為防止雜菌污染，操作者的雙手需要進行清洗和

（酒精）消毒

（酒精）消毒

。
（2）剛果紅（簡稱CR）是一種染料，在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物。當纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅—纖維素的復合物就無法形成。如表為鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基配方。

成分	羧甲基纖維素鈉	酵母膏	KH2PO4	瓊脂	土豆汁	配制濃度為10mg/mL的CR溶液，滅菌后按照每200mL培養(yǎng)基加入1mL的比例加入CR溶液
含量（g）	5.0～10.0	1	0.25	15	100mL
操作	將上述物質溶解后，用蒸餾水定容到1000mL

用該培養(yǎng)基來培養(yǎng)纖維素分解菌，培養(yǎng)結果如圖1（黑點代表菌落）。其中分解纖維素能力最強的是菌落

E

E

，原因是

剛果紅與纖維素反應形成紅色復合物，纖維素分解菌能夠分解纖維素，因此纖維素分解菌周圍會形成透明圈，且分解能力越強透明圈越大

剛果紅與纖維素反應形成紅色復合物，纖維素分解菌能夠分解纖維素，因此纖維素分解菌周圍會形成透明圈，且分解能力越強透明圈越大

。

（3）圖2和圖3是分離培養(yǎng)纖維素分解菌的結果圖，其對應的接種方法分別是

稀釋涂布平板法

稀釋涂布平板法

和

平板劃線法

平板劃線法

，接種過程中，圖2所示方法接種工具至少需灼燒滅菌

5

5

次。
（4）將5g土壤溶于45mL無菌水，再稀釋10⁴倍，分別按圖1接種方式將0.1mL樣品接種到5個培養(yǎng)基上，統(tǒng)計菌落數(shù)目為156、158、160，據(jù)此可得出每克土壤中的纖維素分解菌活菌數(shù)約為

1.58×10⁸

1.58×10⁸

個。若某同學利用相同樣品進行接種，只統(tǒng)計出25個菌落，出現(xiàn)該結果的原因是

涂布器灼燒后未冷卻即涂布，高溫下纖維素分解菌被燙死；培養(yǎng)液未搖勻即取樣，樣品中纖維素分解菌過少

涂布器灼燒后未冷卻即涂布，高溫下纖維素分解菌被燙死；培養(yǎng)液未搖勻即取樣，樣品中纖維素分解菌過少

。