蘋果的花為兩性花，蘋果切開或咬開后不久顏色便會加深，這種現(xiàn)象稱為“褐變”。褐變是由位于細(xì)胞器中的多酚氧化酶（PPO）催化位于液泡中的多酚類物質(zhì)（如綠原酸等）生成棕色色素所致。據(jù)此，科研人員培育出了褐變能力顯著降低的轉(zhuǎn)基因蘋果，其工作流程如圖所示。請據(jù)圖回答有關(guān)問題：
（1）根據(jù)題干信息判斷，要想構(gòu)建褐變能力顯著降低的轉(zhuǎn)基因蘋果，以下基因中可作為目的基因的有 ③⑤③⑤（填序號）。
①卡那霉素抗性基因
②綠原酸合成基因
③棕色色素降解基因
④提高液泡滲透壓的基因
⑤抑制PPO表達(dá)的基因
（2）實施圖中步驟①所需要的酶是 限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶。
（3）步驟④是植物組織培養(yǎng)的重要階段，這個階段稱為 脫分化脫分化；該階段使用的MS培養(yǎng)基中需要添加 生長素和細(xì)胞分裂素生長素和細(xì)胞分裂素等植物激素，從基因工程流程的角度考慮，還需要添加 卡那霉素卡那霉素以便篩選。
（4）一般而言，在經(jīng)歷步驟⑤后培育出來的轉(zhuǎn)基因植株中，目的基因插在一條染色體上。要想培育轉(zhuǎn)基因純合子的蘋果植株，較為合理可行的方案是 讓轉(zhuǎn)基因植株連續(xù)自交（或單倍體育種）讓轉(zhuǎn)基因植株連續(xù)自交（或單倍體育種）。
（5）為了評估目的基因?qū)σ种铺O果褐變的效果，需要選擇無目的基因的對照植株，如野生株（同樣進(jìn)行步驟②、④、⑤操作）或含質(zhì)粒pBI121的植株，兩者中最佳的是用 含質(zhì)粒pBI121的植株含質(zhì)粒pBI121的植株（填“野生株”或“含質(zhì)粒pBI121的植株”），理由是 排除質(zhì)粒pBI121中的基因?qū)嶒灲Y(jié)果的干擾排除質(zhì)粒pBI121中的基因?qū)嶒灲Y(jié)果的干擾。
【考點】基因工程的操作過程綜合；植物的組織培養(yǎng)．
【答案】③⑤；限制酶和DNA連接酶；脫分化；生長素和細(xì)胞分裂素；卡那霉素；讓轉(zhuǎn)基因植株連續(xù)自交（或單倍體育種）；含質(zhì)粒pBI121的植株；排除質(zhì)粒pBI121中的基因?qū)嶒灲Y(jié)果的干擾
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/6 8:0:9組卷：2引用：1難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6