科學(xué)家將人的生長激素基因與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組,并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)。但在進(jìn)行基因工程的操作過程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒,便于重組和篩選,已知限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-G↓GATCC-,限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-↓GATC-,請(qǐng)據(jù)圖回答:
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(1)過程①所需要的酶是 逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄酶。
(2)在構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程中,應(yīng)用限制酶 ⅠⅠ切割質(zhì)粒,用限制酶 ⅡⅡ切割目的基因。用限制酶切割目的基因和載體后形成的黏性末端通過 堿基互補(bǔ)配對(duì)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則進(jìn)行連接。人的基因之所以能與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組,原因是 人的基因與大腸桿菌DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)相同人的基因與大腸桿菌DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)相同。
(3)在過程③中一般將受體大腸桿菌用 CaCl2溶液CaCl2溶液進(jìn)行處理,用以增大 細(xì)胞壁細(xì)胞壁的通透性,使重組DNA容易進(jìn)入受體細(xì)胞。
(4)將得到的大腸桿菌B涂布在一個(gè)含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上,得到如圖a所示的結(jié)果(圓點(diǎn)表示菌落),該結(jié)果說明能夠生長的大腸桿菌中已導(dǎo)入了 普通質(zhì)?;蛑亟M質(zhì)粒普通質(zhì)?;蛑亟M質(zhì)粒,反之則沒有導(dǎo)入;再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基a上,使絨布表面沾上菌落,然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖b所示的結(jié)果(圓圈表示與圖a中培養(yǎng)基上對(duì)照無菌落的位置)。與圖b圓圈相對(duì)應(yīng)的圖a中的菌落表現(xiàn)型是 抗氨芐青霉素而不抗四環(huán)素抗氨芐青霉素而不抗四環(huán)素,這些大腸桿菌中導(dǎo)入了 重組質(zhì)粒重組質(zhì)粒。
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【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶;Ⅰ;Ⅱ;堿基互補(bǔ)配對(duì);人的基因與大腸桿菌DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)相同;CaCl2溶液;細(xì)胞壁;普通質(zhì)?;蛑亟M質(zhì)粒;抗氨芐青霉素而不抗四環(huán)素;重組質(zhì)粒
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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