乳糖酶能夠催化乳糖水解為葡萄糖和半乳糖，在工業(yè)生產(chǎn)中具有重要價(jià)值。乳糖酶的制備及固定化步驟如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：

（1）用于培養(yǎng)產(chǎn)乳糖酶的微生物L(fēng)的培養(yǎng)基在接種前需要通過(guò)

高壓蒸汽

高壓蒸汽

法進(jìn)行滅菌。研究人員通常根據(jù)菌落的

形狀、大小、隆起程度和顏色等

形狀、大小、隆起程度和顏色等

特征來(lái)初步區(qū)分不同種的微生物，統(tǒng)計(jì)菌落種類和數(shù)量時(shí)要每隔24h觀察統(tǒng)計(jì)一次，直到

各類菌落數(shù)目穩(wěn)定

各類菌落數(shù)目穩(wěn)定

時(shí)。
（2）為了得到產(chǎn)乳糖酶微生物L(fēng)的單菌落，可用

稀釋涂布平板或平板劃線

稀釋涂布平板或平板劃線

法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用

甘油管藏

甘油管藏

的方法。
（3）采用凝膠色譜法分離純化其中的乳糖酶時(shí)，比乳糖酶相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)先被洗脫分離出來(lái)，原因是

相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)，不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動(dòng)，路程短，移動(dòng)的速度快

相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)，不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動(dòng)，路程短，移動(dòng)的速度快

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（4）工業(yè)生產(chǎn)中往往將乳糖酶固定在

不溶于水

不溶于水

（填“溶于水”或“不溶于水”）的載體上，將其裝入反應(yīng)柱內(nèi)后，需用蒸餾水充分洗滌固定化酶柱，以除去未吸附的乳糖酶。一般來(lái)說(shuō)，酶不適合采用包埋法固定化，原因是

酶體積小，容易從包埋材料中漏出

酶體積小，容易從包埋材料中漏出

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