研究人員利用轉基因技術改造乳酸桿菌，將其添加于飼料中，以提高家禽養(yǎng)殖效率。枯草芽孢桿菌能分泌一種可降解纖維素的酶，這種酶由W基因編碼。為在乳酸桿菌中表達W基因，需使用圖1中質粒為載體，圖2為含W基因的DNA片段。
（1）采用 PCRPCR技術可以快速、大量獲得W基因。利用該技術擴增目的基因時，要有 目的基因兩端的已知核苷酸序列目的基因兩端的已知核苷酸序列，以便合成引物，該技術需要 dATP、dGTP、dCTP、dTTP（或dNTP）dATP、dGTP、dCTP、dTTP（或dNTP）等作為原料和直接能源物質。
（2）啟動子是 RNA聚合酶RNA聚合酶識別和結合的部位。很多啟動子具有物種特異性，在圖1質粒中插入W基因，其上游啟動子應選擇 BB（填寫字母）。
A．枯草芽孢桿菌啟動子
B．乳酸桿菌啟動子
C．農桿菌啟動子
（3）根據圖1和圖2，應使用限制酶 EcoRⅠ、HindⅢEcoRⅠ、HindⅢ切割圖2中含W基因的DNA片段，導入質粒以獲得能正確表達W基因的重組質粒。所得重組質粒轉化乳酸桿菌后，使用含 氨芐青霉素氨芐青霉素的培養(yǎng)基篩選，以得到轉入W基因的乳酸桿菌。
（4）為確定導入重組質粒的乳酸桿菌是否具有分解纖維素的能力，研究人員用液體培養(yǎng)基分別培養(yǎng)下表所示菌種。取部分菌液上清液測定酶活力，實驗方案及測定結果如表所示。表中的X應為 導入空質粒的乳酸桿菌導入空質粒的乳酸桿菌。
| 菌種 | 酶活性相對值 |
| 乳酸桿菌 | 未檢出 |
| X | 未檢出 |
| 導入了重組質粒的乳酸桿菌 | 0.96 |
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】PCR；目的基因兩端的已知核苷酸序列；dATP、dGTP、dCTP、dTTP（或dNTP）；RNA聚合酶；B；EcoRⅠ、HindⅢ；氨芐青霉素；導入空質粒的乳酸桿菌
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：9引用：1難度：0.6
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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