當(dāng)前位置： 2023年河北省衡水中學(xué)高考生物一模試卷> 試題詳情

研究人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)改造乳酸桿菌，將其添加于飼料中，以提高家禽養(yǎng)殖效率?？莶菅挎邨U菌能分泌一種可降解纖維素的酶，這種酶由W基因編碼。為在乳酸桿菌中表達(dá)W基因，需使用圖1中質(zhì)粒為載體，圖2為含W基因的DNA片段。

（1）采用
PCR
PCR
技術(shù)可以快速、大量獲得W基因。利用該技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，要有
目的基因兩端的已知核苷酸序列
目的基因兩端的已知核苷酸序列
，以便合成引物，該技術(shù)需要
dATP、dGTP、dCTP、dTTP（或dNTP）
dATP、dGTP、dCTP、dTTP（或dNTP）
等作為原料和直接能源物質(zhì)。
（2）啟動(dòng)子是
RNA聚合酶
RNA聚合酶
識(shí)別和結(jié)合的部位。很多啟動(dòng)子具有物種特異性，在圖1質(zhì)粒中插入W基因，其上游啟動(dòng)子應(yīng)選擇
B
B
（填寫(xiě)字母）。
A．枯草芽孢桿菌啟動(dòng)子
B．乳酸桿菌啟動(dòng)子
C．農(nóng)桿菌啟動(dòng)子
（3）根據(jù)圖1和圖2，應(yīng)使用限制酶
EcoRⅠ、HindⅢ
EcoRⅠ、HindⅢ
切割圖2中含W基因的DNA片段，導(dǎo)入質(zhì)粒以獲得能正確表達(dá)W基因的重組質(zhì)粒。所得重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化乳酸桿菌后，使用含
氨芐青霉素
氨芐青霉素
的培養(yǎng)基篩選，以得到轉(zhuǎn)入W基因的乳酸桿菌。
（4）為確定導(dǎo)入重組質(zhì)粒的乳酸桿菌是否具有分解纖維素的能力，研究人員用液體培養(yǎng)基分別培養(yǎng)下表所示菌種。取部分菌液上清液測(cè)定酶活力，實(shí)驗(yàn)方案及測(cè)定結(jié)果如表所示。表中的X應(yīng)為
導(dǎo)入空質(zhì)粒的乳酸桿菌
導(dǎo)入空質(zhì)粒的乳酸桿菌
。

菌種酶活性相對(duì)值

乳酸桿菌未檢出

X 未檢出

導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的乳酸桿菌 0.96

【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．

【答案】PCR；目的基因兩端的已知核苷酸序列；dATP、dGTP、dCTP、dTTP（或dNTP）；RNA聚合酶；B；EcoRⅠ、HindⅢ；氨芐青霉素；導(dǎo)入空質(zhì)粒的乳酸桿菌

【解答】

【點(diǎn)評(píng)】

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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：9引用：1難度：0.6

相似題

1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（　　）

A．若某基因是從人的細(xì)胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的，則該基因中不含啟動(dòng)子序列

B．?dāng)U增目的基因時(shí)，利用耐高溫的DNA連接酶從引物a、b的3′-端進(jìn)行子鏈合成

C．導(dǎo)入人血清白蛋白基因的綿羊受體細(xì)胞是乳腺細(xì)胞

D．利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法可將含有目的基因的重組質(zhì)粒整合到植物受體細(xì)胞的染色體DNA上

發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

解析

2．經(jīng)由食物攝取過(guò)量生物胺會(huì)引起頭痛、胃腸道不適和過(guò)敏等不良反應(yīng)，嚴(yán)重時(shí)甚至危及生命，因此必須對(duì)食品中生物胺的含量進(jìn)行減控。微生物來(lái)源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)?；a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國(guó)科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)了高效表達(dá)。
（1）通過(guò)上述基因工程技術(shù)獲取目標(biāo)產(chǎn)物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是

（填寫(xiě)下列編號(hào)）。
①篩選和鑒定含目的基因的受體細(xì)胞
②選用合適的方法獲取目的基因
③借助發(fā)酵工程規(guī)?；a(chǎn)目標(biāo)蛋白
④目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
⑤目的基因和運(yùn)載體重組構(gòu)建表達(dá)載體
（2）在PCR過(guò)程中，引物的功能是

。
A．啟動(dòng)DNA復(fù)制
B．規(guī)定擴(kuò)增區(qū)間
C．解旋DNA雙鏈
D．充當(dāng)復(fù)制模板

（3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設(shè)計(jì)的PCR引物應(yīng)為圖甲中的

。
（4）獲取目的基因后，需要和載體重組導(dǎo)入受體細(xì)胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是

（填DNA或RNA/DNA或RNA）。
（5）在常規(guī)PCR的每一輪擴(kuò)增反應(yīng)中，溫度隨時(shí)間的變化順序是圖乙中的

。
（6）若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開(kāi)后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質(zhì)粒pCLY15（圖丙中圖1）需用

和

切開(kāi)，才能與MCO片段高效連接。
（7）下列實(shí)驗(yàn)操作中，能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是

。
A．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，用合適的限制酶切割
B．在選擇培養(yǎng)基中添加X(jué)-gal試劑，以克隆的顏色進(jìn)行鑒別
C．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，以此為模板進(jìn)行PCR檢測(cè)
D．將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長(zhǎng)與否加以鑒別
發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5
解析
3．用限制酶EcoRⅤ單獨(dú)切割某普通質(zhì)粒，可產(chǎn)生14kb（1kb即1000個(gè)堿基對(duì)）的長(zhǎng)鏈，而同時(shí)用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒，可得到三種長(zhǎng)度的DNA片段，見(jiàn)圖（其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個(gè)黏性末端）。

若用MboⅠ限制酶單獨(dú)切割該普通質(zhì)粒，則產(chǎn)生的DNA片段的長(zhǎng)度為（　?。?/h2>
A．2.5和5.5 B．2.5和6 C．5.5和8 D．6和8
發(fā)布：2024/11/14 4:0:2組卷：89引用：9難度：0.7
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菌種	酶活性相對(duì)值
乳酸桿菌	未檢出
X	未檢出
導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的乳酸桿菌	0.96

1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）

1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（　　）