萌發(fā)的小麥種子中α-淀粉酶和β-淀粉酶的含量顯著增高。α-淀粉酶不耐酸、較耐熱,在pH為3.6、0℃的條件下可迅速失活,而β-淀粉酶耐酸、不耐熱,在70℃條件下處理15min即失活。根據(jù)它們的這種特性,可分別測(cè)定其中一種酶的催化效率。某實(shí)驗(yàn)小組進(jìn)行了“提取萌發(fā)的小麥種子中的α-淀粉酶并測(cè)定α-淀粉酶催化淀粉水解的最適溫度”的相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)材料:萌發(fā)3天的小麥種子(芽長(zhǎng)約1cm)。
主要試劑及儀器:1mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)麥芽糖溶液、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的可溶性淀粉溶液、碘液、蒸餾水、石英砂、恒溫水浴鍋等。實(shí)驗(yàn)步驟:
步驟一:制備酶溶液。
步驟二:將酶溶液置于70℃水浴鍋中15min后取出并冷卻。
步驟三:
取6支干凈的、體積相同的試管并依次編號(hào)
取6支干凈的、體積相同的試管并依次編號(hào)
,按下表要求加入試劑,再觀察各試管內(nèi)的顏色變化。
試管編號(hào) |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
① |
質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的可溶性淀粉溶液(mL) |
8 |
8 |
8 |
8 |
8 |
8 |
恒溫水浴5min(℃) |
0 |
20 |
40 |
60 |
80 |
100 |
② |
經(jīng)步驟二處理的酶溶液(mL) |
1 |
1 |
1 |
1 |
1 |
1 |
恒溫水浴5min(℃) |
0 |
20 |
40 |
60 |
80 |
100 |
將①、②對(duì)應(yīng)溶液混合,振蕩后恒溫水浴5min(℃) |
0 |
20 |
40 |
60 |
80 |
100 |
加入碘液,振蕩后觀察顏色變化 |
+++ |
++ |
+ |
- |
++ |
+++ |
(注:+表示變藍(lán)色,-表示不變色)
請(qǐng)回答下列問題:
(1)步驟二中“置于70℃水浴鍋中15min”和“冷卻”的目的分別是
使β-淀粉酶失活
使β-淀粉酶失活
、
保存并保持α-淀粉酶的活性
保存并保持α-淀粉酶的活性
。
(2)完善步驟三
取6支干凈的、體積相同的試管并依次編號(hào)
取6支干凈的、體積相同的試管并依次編號(hào)
。
(3)該實(shí)驗(yàn)中能否選用斐林試劑檢測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果?
不能
不能
(填“能”或“不能”)。理由是
該實(shí)驗(yàn)中需要控制溫度,利用斐林試劑檢測(cè)時(shí)需要水浴加熱,會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果
該實(shí)驗(yàn)中需要控制溫度,利用斐林試劑檢測(cè)時(shí)需要水浴加熱,會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果
。
(4)若要進(jìn)一步研究小麥種子中β-淀粉酶的最適溫度,則需獲得β-淀粉酶保持活性而α-淀粉酶失活的酶溶液。請(qǐng)簡(jiǎn)要寫出具體操作:
將通過步驟一制備的酶溶液的pH調(diào)至3.6,并置于溫度為0℃的環(huán)境中一定時(shí)間后取出,并調(diào)pH和溫度至正常
將通過步驟一制備的酶溶液的pH調(diào)至3.6,并置于溫度為0℃的環(huán)境中一定時(shí)間后取出,并調(diào)pH和溫度至正常
。