黑曲霉是一種絲狀真菌，其代謝產(chǎn)物廣泛應(yīng)用于食品加工等領(lǐng)域?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）黑曲霉的PDA液體產(chǎn)酶培養(yǎng)基組成為：麩皮、豆粉餅、（NH₄）₂SO₄、MgSO₄?7H₂O、KH₂PO₄，培養(yǎng)時(shí)需要通氣振蕩，由此可知黑曲霉的代謝類型為

異養(yǎng)需氧型

異養(yǎng)需氧型

；豆粉餅可提供黑曲霉生長(zhǎng)所需的

碳源和氮源

碳源和氮源

；若要分離黑曲霉菌落，上述培養(yǎng)基中還需要添加

瓊脂

瓊脂

，在培養(yǎng)基滅菌前需將pH調(diào)至

酸性

酸性

（填“酸性”“中性”或“堿性”）。
（2）計(jì)數(shù)黑曲霉菌液孢子濃度的方法為：用多層紗布過(guò)濾黑曲霉培養(yǎng)液得到孢子懸浮液，取1mL懸浮液用無(wú)菌水逐級(jí)稀釋10⁴倍，再取稀釋液滴加至血細(xì)胞計(jì)數(shù)板（規(guī)格為1mm×1mm×0.1mm,由400個(gè)小格組成）進(jìn)行計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)得到計(jì)數(shù)的小格中平均孢子數(shù)2個(gè)，則黑曲霉培養(yǎng)液中孢子濃度為為

8×10¹⁰

8×10¹⁰

個(gè)mL^-1。
（3）以大豆為主要原料，利用黑曲霉產(chǎn)生的蛋白酶可將原料中的蛋白質(zhì)水解成

小分子肽和氨基酸

小分子肽和氨基酸

，然后經(jīng)淋洗、調(diào)制可得到醬油。
（4）黑曲霉發(fā)酵產(chǎn)生的檸檬酸是一種使用廣泛的食品酸度調(diào)節(jié)劑。研究表明，幾丁質(zhì)酶基因chsC沉默與黑曲霉的菌絲形態(tài)和檸檬酸的產(chǎn)量有一定的相關(guān)性。利用基因工程技術(shù)構(gòu)建干擾chsC基因表達(dá)的載體并導(dǎo)入黑曲霉菌體內(nèi)，上述操作的步驟為：①首先從黑曲霉中提取DNA作為模板，利用

PCR

PCR

技術(shù)擴(kuò)增出chsC基因；構(gòu)建chsC基因表達(dá)的干擾載體時(shí)需要用到的工具有

限制酶、DNA連接酶、載體

限制酶、DNA連接酶、載體

；需要將chsC基因

反向

反向

（填“正向”或“反向”）插入到啟動(dòng)子和終止子之間，以保證轉(zhuǎn)錄出的RNA和chsC基因正常轉(zhuǎn)錄的mRNA互補(bǔ)成雙鏈，從而干擾幾丁質(zhì)酶的合成。②最終可通過(guò)

抗原—抗體雜交

抗原—抗體雜交

法鑒定轉(zhuǎn)基因黑曲霉菌體培育是否成功。