黃曲霉是常見于發(fā)霉的糧食、糧制品上的真菌,特別多見于是發(fā)霉的花生、玉米中。黃曲霉素是黃曲霉的代謝產(chǎn)物,具有極強的毒性和致癌性。在高溫多雨潮濕的華南地區(qū)的糧食、食品和飲料中黃曲霉毒素的檢出率比較高??蒲腥藛T用黃曲霉素B1(AFB1)的結(jié)構(gòu)類似物香豆素(C9H6O2)篩選出能高效降解AFB1的菌株,具體過程如圖所示(序號代表過程)。
(1)為了篩選到AFB1降解菌,常從發(fā)霉的花生、玉米中采樣,主要原因是
發(fā)霉花生、玉米中富含AFB1,可能含有較多的AFB1降解菌
發(fā)霉花生、玉米中富含AFB1,可能含有較多的AFB1降解菌
。篩選AFB1降解菌實驗時,圖中1號培養(yǎng)基的碳源是 香豆素
香豆素
。過程③所需要的主要工具有 無菌滴管(移液槍/移液管)和無菌涂布器
無菌滴管(移液槍/移液管)和無菌涂布器
(寫出兩種)。
(2)菌體對有機物的降解途徑有胞外分泌物降解和菌體吸附降解兩種??蒲腥藛T對降解菌的發(fā)酵液進行離心,發(fā)現(xiàn)上清液中AFB1的殘留率明顯低于菌沉淀液的殘留率。可推測,菌體降解AFB1的途徑主要是 胞外分泌物降解
胞外分泌物降解
。
(3)經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn)上清液中存在多種蛋白質(zhì),為驗證蛋白質(zhì)K是降解AFB1的有效成分,科研小組利用培養(yǎng)過降解菌的上清液、蛋白質(zhì)K水解酶液、含AFB1的培養(yǎng)基等為材料,設(shè)計了如下實驗。請補充完善實驗步驟,并預(yù)測實驗結(jié)果。
實驗步驟:①取兩支試管分別編號甲、乙。甲、乙兩支試管中分別加入等量的 降解菌的上清液
降解菌的上清液
。
②甲試管中加入適量的 蛋白質(zhì)K水解酶液
蛋白質(zhì)K水解酶液
,乙試管中加入等量的 蒸餾水
蒸餾水
作為對照。
③一段適當(dāng)?shù)臅r間后,分別加入等量的含AFB1的培養(yǎng)基
含AFB1的培養(yǎng)基
。
④分別測定甲乙試管培養(yǎng)基中AFB1含量。
預(yù)測實驗結(jié)果:甲試管培養(yǎng)基中AFB1含量明顯大于乙試管
甲試管培養(yǎng)基中AFB1含量明顯大于乙試管
。