【加試題】某小組欲進行煙草原生質(zhì)體分離與培養(yǎng)的研究。請回答：
（1）原生質(zhì)體的分離：在無菌條件下，取煙草無菌苗的葉片，放入含有0.5mol/L甘露醇（維持較高滲透壓）的

纖維素酶和果膠酶

纖維素酶和果膠酶

混合液處理，經(jīng)過離心純化后獲得原生質(zhì)體。
（2）原生質(zhì)體的培養(yǎng)：將原生質(zhì)體進行培養(yǎng)，重新長出細胞壁，形成胚性細胞。此時，應(yīng)該

降低

降低

培養(yǎng)基中甘露醇濃度，以利于胚性細胞繼續(xù)培養(yǎng)形成細胞團，然后經(jīng)兩條途徑形成再生植株。途徑一：細胞團經(jīng)球形胚、

心形胚

心形胚

和胚狀體，最后發(fā)育成植株。途徑二：細胞團增殖為愈傷組織，然后在發(fā)芽培養(yǎng)基上誘導(dǎo)出芽，切割芽經(jīng)過生根后形成完整植株。上述發(fā)芽培養(yǎng)基中含量相對較高的激素是

細胞分裂素

細胞分裂素

，胚性細胞的主要特點是：

D

D

。
（A．液泡小、細胞核小  B．液泡大，細胞核大  C．液泡大，細胞核小  D．液泡小、細胞核大）
（3）為了對煙草的某些性狀進行改良，分離的到兩種煙草的原生質(zhì)體后，通過

原生質(zhì)體融合

原生質(zhì)體融合

方法將他們的遺傳物質(zhì)組合在一起，經(jīng)培養(yǎng)獲得具有新性狀的再生植株。提取再生植株的DNA，采用

PCR

PCR

擴增相關(guān)基因，來鑒定遺傳物質(zhì)是否成功重組。