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近年來(lái),科學(xué)家們陸續(xù)在動(dòng)物、植物、真菌和細(xì)菌中發(fā)現(xiàn)了朊病毒。2019年1月,《自然--通訊》雜志發(fā)表了來(lái)自我國(guó)科學(xué)家許曉東等人的研究成果,他們對(duì)一種桿狀病毒的晚期表達(dá)因子LEF-10蛋白進(jìn)行了研究,確定其為由病毒編碼的朊病毒,此項(xiàng)研究將朊病毒存在的范圍拓展至病毒界。至此,“朊病毒廣泛存在”終于得到了證實(shí)。
(1)對(duì)LEF-10蛋白進(jìn)行分離、純化和鑒定,需采用
凝膠色譜法
凝膠色譜法
及電泳技術(shù)。前者是利用相對(duì)分子質(zhì)量大小分離蛋白質(zhì),而電泳是利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及
分子本身大小和形狀等
分子本身大小和形狀等
(答兩點(diǎn))的不同,使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速率,從而分離樣品的過(guò)程。對(duì)已純化的蛋白質(zhì)進(jìn)行鑒定時(shí),通常采用 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳,根據(jù)如圖3所示的電泳結(jié)果,某同學(xué)得出“該蛋白質(zhì)分子具有兩條鏈”的結(jié)論。你認(rèn)為這種說(shuō)法可靠嗎?請(qǐng)說(shuō)明理由:
不可靠,該結(jié)果只能說(shuō)明有兩種相對(duì)分子質(zhì)量不同的肽鏈,不知道有幾條
不可靠,該結(jié)果只能說(shuō)明有兩種相對(duì)分子質(zhì)量不同的肽鏈,不知道有幾條

(2)利用某酵母菌株進(jìn)行實(shí)驗(yàn),以確定 LEF-10蛋白是否能表現(xiàn)出朊病毒特性。已知酵母細(xì)胞中的Sup35蛋白受到一定刺激后可能會(huì)發(fā)生空間結(jié)構(gòu)改變,變成朊病毒,Sup35蛋白以及“朊病毒化”后的Sup35蛋白對(duì)酵母細(xì)胞代謝過(guò)程影響如圖1,部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2。

現(xiàn)利用LEF-10蛋白基因替代Sup35蛋白基因的部分序列(即決定 Sup35 蛋白朊病毒化的DNA 片段),新表達(dá)出的蛋白具備Sup35控制代謝的功能以及LEF-10的特性,培養(yǎng)觀察酵母菌落特征。對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿的滅菌方式分別為
高壓蒸汽滅菌法
高壓蒸汽滅菌法
干熱滅菌法
干熱滅菌法
。滅菌后的培養(yǎng)基需冷卻至
50
50
℃左右時(shí)倒平板,原因是:
溫度過(guò)高不便于用手操作,溫度過(guò)低培養(yǎng)基將發(fā)生凝固
溫度過(guò)高不便于用手操作,溫度過(guò)低培養(yǎng)基將發(fā)生凝固
。培養(yǎng)結(jié)果出現(xiàn)
白色
白色
菌落即可作為L(zhǎng)EF-10蛋白可以表現(xiàn)出朊病毒特性的證據(jù)。

【答案】凝膠色譜法;分子本身大小和形狀等;不可靠,該結(jié)果只能說(shuō)明有兩種相對(duì)分子質(zhì)量不同的肽鏈,不知道有幾條;高壓蒸汽滅菌法;干熱滅菌法;50;溫度過(guò)高不便于用手操作,溫度過(guò)低培養(yǎng)基將發(fā)生凝固;白色
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:13引用:2難度:0.7
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