營養(yǎng)缺陷型菌株是指野生型菌株經(jīng)過人工誘變或自然突變失去合成某種營養(yǎng)的能力，只有在基本培養(yǎng)基中補充所缺乏的營養(yǎng)因子后才能生長的菌株，包括氨基酸缺陷型菌株、維生素缺陷型菌株和堿基缺陷型菌株等。篩選營養(yǎng)缺陷型菌株的常規(guī)步驟為：誘變育種→淘汰野生型→檢出缺陷型→鑒定缺陷型。
（1）用紫外線誘變大腸桿菌，誘變后常采用選擇培養(yǎng)基淘汰野生型大腸桿菌，使營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌得以富集。培養(yǎng)大腸桿菌時，需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至 中性或弱堿中性或弱堿性，再在壓力和溫度分別為 100kPa,121℃100kPa,121℃的條件下進行高壓蒸汽滅菌。
（2）夾層平板培養(yǎng)法可用于營養(yǎng)缺陷型菌株的檢出，其原理如圖1所示，先在培養(yǎng)皿上倒一薄層基本培養(yǎng)基，凝固后再接種一層誘變處理的菌液，其上再澆一層基本培養(yǎng)基，凝固后放入 恒溫培養(yǎng)箱恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)出菌落，再倒一層完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。若結果如圖2所示，其中菌落 BB（填“A”或“B”）即為檢出的營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌菌株。
（3）研究小組一利用生長圖譜法初步確定檢出的營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌的類型，即在基本培養(yǎng)基乙的A～E這5個區(qū)域中分別添加不同的營養(yǎng)物質，然后用 稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法法將檢出的營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌接種在圖3培養(yǎng)基上，若培養(yǎng)一段時間后在圖3的BC交界處長出了菌落，則說明該菌株是 abab。
a.氨基酸缺陷型菌株
b.維生素缺陷型菌株
c.堿基缺陷型菌株
（4）研究小組二用上述方法鑒定了某菌株屬于維生素營養(yǎng)缺陷型，為了進一步確定該菌株的具體類型，他們把15種維生素按照不同組合分為5個小組，用5個濾紙片分別蘸取不同小組的維生素，然后覆于接種后的瓊脂平板上培養(yǎng)一段時間。
| 組別 | 維生素組合 | ||||
| 1 | 維生素A | 維生素B1 | 維生素B2 | 維生素B6 | 維生素B12 |
| 2 | 維生素C | 維生素B1 | 維生素D2 | 維生素E | 煙酰胺 |
| 3 | 葉酸 | 維生素B2 | 維生素D2 | 膽堿 | 泛酸鈣 |
| 4 | 對氨基苯甲酸 | 維生素B6 | 維生素E | 膽堿 | 肌醇 |
| 5 | 生物素 | 維生素12 | 煙酰胺 | 泛酸鈣 | 肌醇 |
維生素B1
維生素B1
；若菌株為葉酸和生物素的雙營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌，則其在圖4培養(yǎng)基上形成菌落的位置是 3與5的交界處
3與5的交界處
。【答案】中性或弱堿；100kPa，121℃；恒溫培養(yǎng)箱；B；稀釋涂布平板法；ab；維生素B1；3與5的交界處
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/8/8 8:0:9組卷：9引用：2難度：0.6
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1．致病菌與抗生素。
結核病是由結核分枝桿菌引起的傳染病。 結核分枝桿菌的細胞壁厚脂質含量高，能抵御不利自然環(huán)境，在干痰中可存活 6-8 個月，若黏附于塵埃上可保持傳染性 8-10 天。人體被感染后結核分枝桿菌可侵犯全身各組織器官，但以肺部感染最多。
（1）結核病的傳播途徑主要是。
A、空氣傳播 B、接觸傳播 C、媒介物傳播 D、病媒傳播
（2）根據(jù)病原菌在體內(nèi)的感染部位，推測結核分枝桿菌的代謝方式是。
A、異養(yǎng)厭氧型 B、自養(yǎng)厭氧型 C、自養(yǎng)好氧型 D、異養(yǎng)好氧型
為探究不同抗生素對結核分枝桿菌的抑菌效果，研究者從患者體內(nèi)提取的病原菌進行分離培養(yǎng)。 培養(yǎng)結核分枝桿菌的培養(yǎng)基主要含有天門冬氨酸、甘油、雞蛋黃、KH2PO4、MgSO4等。
（3）此培養(yǎng)基成分中既能作為氮源同時提供生長因子的是。
將分離得到的結核分枝桿菌進行增殖培養(yǎng)后，取細菌培養(yǎng)液 2 滴涂布于固體培養(yǎng)基上，然后將浸有相同濃度不同種類的抗生素圓紙片置于培養(yǎng)基表面，37℃培養(yǎng) 4 周，實驗結果如圖1．其中圓紙片 A、B 分別浸過抗生素 A 和抗生素 B，圓紙片 C 浸過抗生素 A、B 的混合物。圖2是細菌結構示意圖，圖中箭頭表示不同抗生素的作用位置。
（4）欲得到如圖1實驗結果，接種過程用到的實驗器材有（多選）。
（5）實驗中圓紙片 D 用作實驗對照，對圓紙片D的處理方法是。根據(jù)實驗結果，說明圓紙片周圍清晰區(qū)大小與抗生素抑菌效果的關系：，并從抗生素對細菌產(chǎn)生的作用解釋圓紙片C周圍清晰區(qū)大于圓紙片A和B的原因。發(fā)布：2024/12/22 8:0:1組卷：33引用：1難度：0.6 -
2．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細菌的分解，就不能很好地被植物利用．生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，某生物興趣小組同學試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，設計了以下實驗，并成功篩選到能把尿素高效降解為氨的細菌（目的菌）．培養(yǎng)基成分如下表所示，實驗步驟乳下圖所示．請分析回答問題．
（1）此培養(yǎng)基能否用于植物組織培養(yǎng)？KH2PO4 1.4g Na2HPO4 2.1g MgSO4?7H2O 0.2g 葡萄糖 10g 尿素 1g 瓊脂 15g 將上述物質溶解后，
用自來水定容到1 000mL，理由是．
（2）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選，這種培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基．
（3）“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的和．
（4）轉為固體培養(yǎng)時，常采用接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選．
（5）下列材料或用具中：
①培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿
②玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管
③實驗操作者的雙手
需要滅菌的是：；需要消毒的是：．（填序號）
（6）實驗結果后，使用過的培養(yǎng)基應該進行處理后，才能倒掉．發(fā)布：2024/12/22 8:0:1組卷：11引用：1難度：0.5 -
3．某種物質S（一種含有C、H、N的有機物）難以降解，會對環(huán)境造成污染，只有某些細菌能降解S。研究人員按照如圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細菌菌株。實驗過程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無機鹽、水和S，乙的組分為無機鹽、水、S和Y?；卮鹣铝袉栴}：
（1）乙培養(yǎng)基中的Y物質是。甲、乙培養(yǎng)基均屬于培養(yǎng)基。
（2）實驗中初步估測搖瓶M中細菌細胞數(shù)為2×107個/mL，若要在每個平板上涂布0.1mL稀釋后的菌液，且保證每個平板上長出的菌落數(shù)不超過200個，則至少應將搖瓶M中的菌液稀釋倍。
（3）在步驟⑤的篩選過程中，發(fā)現(xiàn)當培養(yǎng)基中的S超過某一濃度時，某菌株對S的降解量反而下降，其原因可能是（答出1點即可）。
（4）上述實驗中，甲、乙兩種培養(yǎng)基所含有的組分雖然不同，但都能為細菌的生長提供4類營養(yǎng)物質，即。發(fā)布：2024/12/27 8:0:2組卷：5引用：2難度：0.7
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