隨著社會(huì)的發(fā)展,人們對(duì)抗生素的需求量日益增大。干擾素是一種應(yīng)用廣泛的蛋白質(zhì)類抗生素,基因工程技術(shù)已成為獲得優(yōu)質(zhì)干擾素的重要途徑之一。人們利用大腸桿菌獲得目的干擾素的過程如圖1所示?;卮鹣铝袉栴}:
(1)圖1中獲得干擾素基因需要用到
限制
限制
酶,該種酶 具有
具有
(填“具有”或“不具有”)特異性。已知將重組質(zhì)?!耙浦病比氪竽c桿菌前,需要將大腸桿菌用Ca2+進(jìn)行處理,這樣做的目的是 使大腸桿菌細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)
使大腸桿菌細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)
。
(2)目的基因的部分堿基序列如圖2所示,不同限制酶的切割位點(diǎn)如表所示,則切割目的基因可選擇 NcoⅠ
NcoⅠ
和 NheⅠ
NheⅠ
兩種限制酶。
限制酶 |
NcoⅠ |
SphⅠ |
NheⅠ |
BamHⅠ |
識(shí)別序列和切割位點(diǎn) |
5′-C↓CATGG-3′ |
5′-GCTAG↓C-3′ |
5′-G↓GATCC-3′ |
5′-G↓CTAGC-3′ |
(3)在分子水平上,可采用
PCR技術(shù)
PCR技術(shù)
和
抗原—抗體雜交
抗原—抗體雜交
的方法檢測(cè)目的基因是否在受體細(xì)胞中成功表達(dá)。若成功表達(dá),則說明人和大腸桿菌在基因表達(dá)過程中共用一套
遺傳密碼子
遺傳密碼子
。