徑柳匙葉草是一種泌鹽植物??蒲泄ぷ髡邔搅兹~草液泡膜Na+/K+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因(TaNHX2基因)轉(zhuǎn)移到棉花細(xì)胞內(nèi),獲得了轉(zhuǎn)基因耐鹽棉花新品種。圖1是獲取的含有目的基因的DNA片段,Sau3AⅠ、EcoRⅠ、BamHⅠ為三種限制酶,圖中箭頭所指為三種限制酶的切點(diǎn);圖2是三種限制酶的識(shí)別序列與酶切位點(diǎn)示意圖;圖3是土壤農(nóng)桿菌中用于攜帶目的基因的Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖,請(qǐng)分析回答問(wèn)題:
(1)將含有徑柳匙葉草不同基因的DNA片段導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存,再根據(jù)TaNHX2基因的特定核苷酸序列從中提取圖1的片段,此法為從
從基因文庫(kù)中獲取
從基因文庫(kù)中獲取
獲取目的基因。
(2)不能在徑柳匙葉草根尖分生區(qū)細(xì)胞中獲得TaNHX2基因的mRNA,其原因是 Na+/K+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白位于液泡膜上,徑柳匙葉草根尖分生區(qū)細(xì)胞中TaNHX2基因不能表達(dá)
Na+/K+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白位于液泡膜上,徑柳匙葉草根尖分生區(qū)細(xì)胞中TaNHX2基因不能表達(dá)
。
(3)若用BamHⅠ切割圖1所示的DNA片段,獲得目的基因,則需選用 Sau3AⅠ
Sau3AⅠ
切割圖3所示質(zhì)粒,以便構(gòu)建基因表達(dá)載體,該方案的缺陷是 出現(xiàn)目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化、目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定
出現(xiàn)目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化、目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定
。故切割圖1所示DNA片段的最佳方案是選用 EcoRⅠ和BamHⅠ
EcoRⅠ和BamHⅠ
酶。
(4)用上述最佳方案構(gòu)建基因表達(dá)載體,所得重組質(zhì)粒 不一定能
不一定能
(選填“能”“不能”或“不一定能”)被BamHⅠ切割。