科研人員將乳酸菌的乳酸脫氫酶基因（LDH）導(dǎo)入酵母菌，通過酵母菌發(fā)酵生產(chǎn)，乳酸；以解決乳酸菌難以在高密度下培養(yǎng)，乳酸產(chǎn)量低的問題?；卮鹣铝袉栴}：
（1）由圖可知，利用PCR獲取LDH基因時所用的引物是 ②③②③；將LDH基因插入質(zhì)粒時，如果LDH基因兩側(cè)沒有相應(yīng)的限制酶切位點，可以在設(shè)計引物時，在上述所選引物的 5′5′（填“3′”或“5′”）端分別添加的堿基序列是 GAATTC、GGGCCCGAATTC、GGGCCC。
（2）如果進(jìn)行上述PCR反應(yīng)沒有得到任何擴(kuò)增產(chǎn)物，則可以采取 降低復(fù)性溫度降低復(fù)性溫度（填“升高復(fù)性溫度”或“降低復(fù)性溫度”）進(jìn)行改進(jìn)。
（3）用EcoRⅠ和ApaⅠ酶切質(zhì)粒和含LDH基因的片段后，將LDH基因連接在質(zhì)粒上時所用的DNA連接酶是 T4DNA連接酶T4DNA連接酶，連接的過程中，會會（填“會”或“不會”）發(fā)生目的基因與目的基因相連并環(huán)化。
（4）在轉(zhuǎn)化酵母菌時，首先將LDH基因表達(dá)載體導(dǎo)入用Ca2+處理后處于一種 能吸收周圍環(huán)境中DNA分子能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)的大腸桿菌中，再將含有目的基因表達(dá)載體的大腸桿菌與酵母菌置于電轉(zhuǎn)杯中，通過電激將目的基因表達(dá)載體導(dǎo)入酵母菌?？梢詮霓D(zhuǎn)化的酵母菌細(xì)胞中提取 （所有或全部或總）蛋白質(zhì)（所有或全部或總）蛋白質(zhì)。利用抗原—抗體雜交予檢測LDH基因在酵母菌細(xì)胞中是否成功表達(dá)，此處的抗原是 乳酸脫氫酶乳酸脫氫酶。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】②③；5′；GAATTC、GGGCCC；降低復(fù)性溫度；T4DNA連接酶；會；能吸收周圍環(huán)境中DNA分子；（所有或全部或總）蛋白質(zhì)；乳酸脫氫酶
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：80引用：2難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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