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科學家發(fā)現(xiàn)細菌中存在清除入侵病毒DNA的功能系統(tǒng),并發(fā)明了CRISPR/Cas9介導的基因組編輯技術,即CRISPR/Cas9系統(tǒng)的Cas9蛋白在gRNA引導下,與靶基因特定序列結合并將DNA雙鏈切斷,實現(xiàn)對基因組定點編輯(如圖1)。請回答:
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(1)從功能上來看,CRISPR/Cas9系統(tǒng)相當于基因工程中的
限制性核酸內切(限制酶)
限制性核酸內切(限制酶)
酶,該系統(tǒng)廣泛存在于細菌中,可推測其在細菌中的作用是
切割外源DNA,使之失效,起到保護自身的目的(或抵抗外源DNA的入侵,保護自身或清除入侵病毒DNA的功能)
切割外源DNA,使之失效,起到保護自身的目的(或抵抗外源DNA的入侵,保護自身或清除入侵病毒DNA的功能)

(2)通過誘發(fā)Cas9基因突變,可獲得只切割靶基因一條鏈的nCas9蛋白。將nCas9蛋白與胞嘧啶脫氨酶融合,能夠對靶位點進行單堿基編輯,實現(xiàn)C→T(G→A)的堿基替換(如圖2)。如果要修正由一對堿基對改變引起的致病基因,可用圖中的
②或③或②和③
②或③或②和③
途徑(從①②③中選擇)。圖2中靶基因復制后得到的基因中目的基因占
50
50
%。
(3)現(xiàn)通過一些技術讓Cas9基因發(fā)生突變,使Cas9蛋白失去切割活性,可將CRISPR/Cas9技術用于抑制基因轉錄,該技術能實施的過程可能是:在gRNA的引導下,Cas9蛋白與靶基因的
啟動子
啟動子
結合,使
RNA聚合酶
RNA聚合酶
失去結合位點從而抑制靶基因的轉錄。

【答案】限制性核酸內切(限制酶);切割外源DNA,使之失效,起到保護自身的目的(或抵抗外源DNA的入侵,保護自身或清除入侵病毒DNA的功能);②或③或②和③;50;啟動子;RNA聚合酶
【解答】
【點評】
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